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CY7.5-DBCO,花菁染料CY7.5标记二苯并环辛炔的反应步骤

时间:2025-09-23 13:54:26       浏览:75
CY7.5-DBCO,花菁染料CY7.5标记二苯并环辛炔的反应步骤
Cy7.5-DBCO 是将 Cy7.5 染料与 DBCO(Dibenzocyclooctyne,二苯并环辛炔)偶联的化合物,用于生物正交反应,尤其是与叠氮基团进行 SPAAC(Strain-Promoted Azide-Alkyne Cycloaddition)环加成反应。其反应步骤包括染料活性化、DBCO 偶联、纯化及表征验证。
首先,Cy7.5 染料通常以活性酯形式(如 NHS 酯)提供。反应前将染料溶解于无水有机溶剂(如 DMSO 或 DMF),以确保活性酯处于可反应状态。DBCO 分子含伯胺或羟基活性位点,用于与 Cy7.5 活性酯发生亲核取代反应。
反应步骤如下:
溶解与缓冲:将 Cy7.5 活性酯溶解于干燥有机溶剂,同时将 DBCO 以摩尔比适当溶解,加入少量有机碱(如 DIPEA)以中和反应生成的酸,提高反应效率。
偶联反应:在室温或轻微升温条件下(20–30℃),使 DBCO 伯胺或羟基攻击 Cy7.5 的活性酯碳原子,形成稳定的酰胺键或酯键,实现染料与 DBCO 的共价结合。反应时间通常为数小时至一夜,根据摩尔比和浓度调控。
反应终止:偶联完成后,通过加入水或缓冲液稀释反应体系,终止反应,减少副反应生成。
纯化:通过 HPLC 或硅胶柱分离纯化 Cy7.5-DBCO,去除游离染料和未反应的 DBCO 分子。纯化后的产物通常冻干储存,避光低温以维持荧光稳定性。
表征:使用 UV-Vis 光谱和荧光光谱验证 Cy7.5 吸收及发射特性,同时用质谱(ESI-MS 或 MALDI-TOF)确认分子量及偶联效率,确保化学结构完整。
通过这些步骤,Cy7.5-DBCO 得到高纯度、光学性能稳定的产物,可用于与叠氮基团进行快速、选择性的生物正交标记,应用于蛋白质标记、纳米载体修饰及药物递送研究。
产品名称:CY7.5-DBCO,花菁染料CY7.5标记二苯并环辛炔
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研

状态:固体/粉末/溶液


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