CypHer5 是一种基于花菁染料（cyanine dye）衍生物的荧光探针，属于 pH 敏感型荧光染料家族，因其独特的光学性质和对酸性环境的响应而广泛应用于生物成像和分子探针的开发。该分子结构中含有芳香环体系与极性取代基，使其具备强烈的吸收和发射能力，同时具有良好的水溶性。其荧光激发和发射波长位于红光区域，通常激发波长约为 630 nm，发射波长在 650–670 nm 之间，能够避开生物体内自发荧光干扰，从而提升信噪比。

CypHer5 的一个显著特点是对 pH 的敏感性。当处于中性或碱性条件时，分子处于荧光猝灭状态，发射信号极弱；而当环境 pH 降低到酸性（如 pH < 6）时，其荧光强度迅速增强。这种特性使得 CypHer5 在研究细胞内吞作用、溶酶体定位、囊泡追踪等过程中成为极为有用的探针。细胞吞噬物或胞吞小泡进入溶酶体后，环境逐渐酸化，染料即可显著发光，从而帮助研究者追踪囊泡路径和细胞内动力学过程。

在光学性质方面，CypHer5 具备较高的摩尔消光系数和良好的量子产率，其荧光信号强烈且稳定，不易受光漂白影响，适合长时间成像。在实际应用中，研究人员常将其与蛋白质、抗体、多肽或纳米颗粒偶联，借助其酸敏感荧光响应监测分子在细胞内的转运、定位和降解过程。例如，将 CypHer5 偶联在胞吞配体分子上，可实时观察该分子是否成功进入酸性溶酶体。

CypHer5 的化学结构设计中通常包含活性官能团，如异硫氰酸酯（-NCS）、琥珀酰亚胺酯（NHS ester）或马来酰亚胺，用于与氨基或巯基修饰的生物分子偶联。这些衍生物使 CypHer5 在生物偶联中具有高度适配性，可以构建多种荧光标记体系。其应用不仅限于细胞成像，还可扩展到高通量筛选、药物递送监测以及纳米探针的设计。

英文名 CypHer 5

CAS号 312961-83-4

分子量 628.76

分子式 C31H36N2O8S2

熔点 N/A

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