Cy7-trichosanthin，花菁染料Cy7标记天花粉蛋白的合成路线概述
花菁染料Cy7标记天花粉蛋白（Cy7-Trichosanthin, Cy7-TCS）是将近红外荧光染料Cy7通过共价化学方式标记至天花粉蛋白（Trichosanthin, TCS）上的功能化分子。该标记既保留TCS的生物活性，又赋予其近红外荧光信号，用于体内外成像、药物递送及蛋白动力学研究。
合成路线概述
蛋白及染料准备
天花粉蛋白在生理缓冲液（如PBS, pH 7.4）中溶解至适宜浓度（通常1–5 mg/mL），确保蛋白分子在水溶液中稳定、不聚集。
Cy7活性衍生物，如Cy7-NHS酯或Cy7-sulfo-NHS酯溶解于少量DMSO中备用，保证其羧基或酰胺活性位点处于可反应状态。
活化与偶联
将Cy7-NHS酯缓慢滴加至TCS溶液中，维持缓冲液pH在7.2–8.0，保证蛋白赖氨酸残基的氨基处于非质子化状态，从而可发生酰胺化反应。
反应通常在4℃或室温条件下进行2–12小时，轻柔搅拌以避免蛋白聚集或变性。
反应比例根据所需标记密度确定，一般Cy7与TCS的摩尔比为2–5:1，以保证标记效率和蛋白活性平衡。
反应终止
通过添加Tris或甘氨酸溶液终止未反应的活性酯，防止非特异性偶联和蛋白降解。
轻轻搅拌均匀，确保终止完全。
纯化与表征
采用透析、凝胶过滤或超滤方法去除游离染料和低分子杂质。
使用UV-Vis光谱检测Cy7吸收峰（约750 nm），通过比色法计算标记度。
可辅以SDS-PAGE或毛细管电泳验证蛋白完整性及标记成功。
产品名称：Cy7-trichosanthin，花菁染料Cy7标记天花粉蛋白
纯度：95%+
规格：mg/g
用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

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仅用于科研，不能用于人体。小编axc