TAMRA-TAT，甲基罗丹明标记细胞穿膜肽TAT的制备方法概述
TAMRA-TAT是一种将红色荧光染料甲基罗丹明（TAMRA, 5(6)-Carboxytetramethylrhodamine）与细胞穿膜肽TAT（Trans-Activator of Transcription, HIV来源，序列通常为YGRKKRRQRRR）偶联形成的功能性分子。TAT肽能够穿透细胞膜，实现大分子或小分子物质的细胞内递送，而TAMRA提供激发约555 nm、发射约580 nm的红色荧光信号，用于细胞成像、追踪肽摄取及活性检测。
制备方法概述：
TAT肽溶解与准备：
将合成的TAT肽溶解于缓冲液（如PBS，pH 7.4–8.0），保持肽链活性。
浓度控制在适宜范围，以保证偶联反应均匀。
TAMRA染料活化：
选择TAMRA羧基活化形式，如TAMRA-NHS酯，提供对肽氨基的亲核反应位点。
溶解于干燥的DMSO或PBS缓冲液，避光操作以防止光漂白。
偶联反应：
将TAMRA-NHS酯缓慢加入TAT肽溶液中，室温轻轻搅拌，反应时间一般为2–4小时。
反应过程中控制pH在7.4–8.5，有利于N端和赖氨酸侧链氨基与NHS酯反应生成稳定的酰胺键。
避光操作，防止染料降解。
纯化：
通过透析、凝胶过滤或反相高效液相色谱（RP-HPLC）去除未反应的TAMRA和小分子副产物。
收集纯化后的TAMRA-TAT，冻干保存，避免光照和高温。
表征：
使用UV-Vis光谱和荧光光谱验证TAMRA标记效率和荧光特性。
质谱或HPLC分析可确认肽的完整性和标记比例。
应用特点：
细胞穿膜功能：TAT肽能够有效将标记分子递送至细胞内，适合小分子、核酸或纳米载体的递送研究。
荧光可视化：TAMRA提供强红色荧光，可进行共聚焦显微镜观察及细胞摄取定量分析。
多功能实验：可用于活细胞成像、肽-药物共递送研究以及药物递送效率优化。
产品名称：TAMRA-TAT
纯度：95%+
规格：mg/g
用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

推荐产品：

.CY5-carboxylic acid
CY5-科罗索酸
FITC-SA
FITC-硬脂酸
Sulfo CY5-Cholylglycine
水溶性CY5-甘氨胆酸
CY7-Resveratrol

仅用于科研，不能用于人体。小编axc