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CY5.5-Hylauronic-Acid,菁染料标记透明质酸的合成步骤

时间:2025-09-25 14:22:40       浏览:168
CY5.5-Hylauronic-Acid,菁染料标记透明质酸的合成步骤
CY5.5-Hyaluronic-Acid(CY5.5-HA)**是一种将近红外荧光染料Cy5.5共价标记于透明质酸(Hyaluronic Acid, HA)分子上的衍生物。HA是多糖,存在于结缔组织、皮肤和眼球等处,具有良好的生物相容性、生物降解性和亲水性。CY5.5标记HA使其具有可视化能力,便于体内外研究其分布、降解及靶向特性。
合成步骤:
材料准备:
透明质酸钠盐(分子量可选5k–200k Da)。
Cy5.5-NHS酯活化荧光染料。
MES缓冲液(pH 6.0)或PBS缓冲液(pH 7.0–7.4)。
去离子水、DMSO或乙醇作为染料溶剂。
偶联原理:
HA分子上含有羧基(-COOH)残基,通过水溶液中EDC(1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳二亚胺)和NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)的活化,可生成活化中间体。
Cy5.5-NH₂或Cy5.5-NHS可与HA活化羧基形成稳定的酰胺键,实现共价偶联。
偶联反应温和,不破坏HA分子链完整性。
具体操作步骤:
将HA溶于MES缓冲液中,加入EDC和NHS活化羧基,反应30–60分钟生成活化HA。
将Cy5.5-NH₂溶于少量DMSO中,缓慢加入活化HA溶液中,轻轻搅拌室温反应数小时,或在4°C过夜。
控制Cy5.5与HA的摩尔比例,通常为1:50–1:200,以获得适宜的标记度。
纯化与表征:
反应结束后,通过透析、超滤或凝胶过滤去除未反应的Cy5.5和小分子副产物。
通过紫外-可见光谱和荧光光谱验证标记效率和荧光性质。
可使用核磁共振(NMR)或质谱分析偶联化学结构。
特性与应用:
CY5.5-HA保持HA的生物相容性和亲水性,可在体内降解为非小分子。
荧光标记使HA可在细胞或动物实验中进行可视化追踪,研究其组织分布、降解动力学及药物递送行为。
可用于构建靶向药物载体、组织工程支架、荧光探针和生物传感器。
近红外荧光特性提供低背景信号和深层组织穿透能力,适合体内成像应用。
产品名称:CY5.5-Hylauronic-Acid,菁染料标记透明质酸
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研

状态:固体/粉末/溶液


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