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FITC-Chondroitin Sulfate,异硫氰酸荧光素标记硫酸软骨素的反应原理

时间:2025-09-30 11:21:49       浏览:109
FITC-Chondroitin Sulfate,异硫氰酸荧光素标记硫酸软骨素的反应原理
硫酸软骨素(Chondroitin Sulfate, CS)是一种高分子多糖,由重复的D-葡萄糖胺和D-葡萄糖醛酸二糖单元组成,并通过O-或N-硫酸化修饰。通过异硫氰酸荧光素(FITC)标记,可以获得FITC-Chondroitin Sulfate荧光探针,用于生物成像、药物载体研究及组织工程实验。
1. 原料与反应原理
原料:CS分子中含有自由氨基(主要位于葡萄糖胺单元)和羟基,为FITC偶联提供反应位点。
反应原理:FITC的异硫氰酸基(–N=C=S)可与CS氨基形成稳定硫脲键(–NH–C(=S)–NH–),在温和碱性条件下实现共价结合。
溶剂与缓冲体系:通常使用碳酸盐缓冲液(pH 9.0–10.0)溶解CS,以保持氨基活性并促进FITC偶联。
2. 制备步骤
溶解CS:将CS粉末溶解于碳酸盐缓冲液,轻轻搅拌至完全溶解形成均一溶液。
FITC溶液制备:FITC溶解于适量DMSO或乙醇中,保持荧光稳定。
偶联反应:将FITC溶液缓慢加入CS溶液中,反应体系避光,在室温或低温下反应12–24小时。
反应终止:加入乙酸或适当缓冲液调节pH至中性,终止偶联反应。
纯化:采用透析(MWCO 3–10 kDa)或凝胶过滤去除游离FITC及小分子杂质。
冻干储存:将纯化后的FITC-CS溶液冻干,得到稳定荧光标记多糖粉末,适合长期保存。
3. 特点与应用
保持CS链结构和水溶性,兼具荧光信号。
适用于细胞摄取、组织分布、药物载体追踪和分子相互作用研究。
FITC标记量可通过FITC摩尔比调控,实现荧光强度可调。
产品名称:FITC-Chondroitin Sulfate,异硫氰酸荧光素标记硫酸软骨素
纯度:95%+
规格:mg/g

用途:科研


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