FITC-OVA，异硫氰酸荧光素标记卵清蛋白的反应机理
卵清蛋白（Ovalbumin, OVA）是一种常用的模型蛋白，在免疫学及生物化学实验中应用。FITC标记OVA形成FITC-OVA荧光探针，可用于抗原追踪、免疫检测及细胞摄取研究。
1. 原料与反应机理
OVA分子中含有赖氨酸残基上的自由氨基，是FITC共价偶联的主要位点。
FITC的异硫氰酸基与蛋白氨基形成稳定硫脲键，实现荧光标记。
2. 合成步骤
蛋白溶解：将OVA溶解于碳酸盐缓冲液（pH 9.0–9.5），保持蛋白稳定并激活氨基。
FITC溶液制备：FITC溶解于DMSO或乙醇中，浓度适中，避光操作。
偶联反应：将FITC溶液缓慢加入OVA溶液中，轻轻搅拌，反应2–8小时，避免蛋白变性。
反应终止：加入适量缓冲液或乙酸调节pH至中性，终止反应。
纯化：通过透析或凝胶过滤去除游离FITC，获得纯化的FITC-OVA。
储存：将FITC-OVA溶液分装冻干或低温保存，避免光照和高温。
3. 特点
保持OVA蛋白原有构象和抗原性。
FITC标记稳定，荧光强度均匀，可用于定量检测。
适用于免疫荧光、流式细胞、内吞与摄取实验。
4. 注意事项
反应过程中避免剧烈振荡或高温，以防蛋白变性。
FITC与蛋白摩尔比需优化，保证荧光标记同时保留蛋白活性。
纯化彻底可减少游离FITC干扰，提高实验信噪比。
产品名称：FITC-OVA，异硫氰酸荧光素标记卵清蛋白
纯度：95%+
规格：mg/g

用途：科研

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仅用于科研，不能用于人体。小编axc