UV-Tracer Biotin Mal（1628028-96-5）的反应机理
UV-Tracer Biotin Mal 是一种集识别标签、紫外可检测功能与巯基特异偶联能力于一体的多功能交联试剂。其结构由三部分组成：① Biotin（生物素）作为高亲和力识别单元，可与亲和素（Avidin）或链霉亲和素（Streptavidin）牢固结合（Kd ≈10⁻¹⁵ M），用于蛋白捕获、分离和检测；② UV-Tracer 发色团具备强紫外吸收特性，允许在 280–350 nm 范围内通过HPLC或UV检测监控反应进程或定量标记效率；③ Maleimide（马来酰亚胺，Mal）为高选择性巯基反应基团，可与半胱氨酸残基或硫醇修饰分子快速形成硫醚键，实现定点偶联。该三功能组合使该分子成为构建生物探针、蛋白标记物、表面修饰材料和药物偶联物的重要工具。
反应机理核心在于马来酰亚胺-巯基加成（Michael Addition）反应。Mal 含有一个活性双键（α,β-不饱和酰亚胺结构），电子缺乏，易接受巯基（–SH）进行 1,4-加成。此过程在中性至微碱性环境（pH 6.5–7.5）下效率高，因为：
低pH时巯基处于质子化状态，反应速率降低；
高pH时Mal环会水解为马来酸酰胺，失去反应活性。
因此，在适当pH下，蛋白半胱氨酸侧链硫原子作为亲核试剂攻击Mal双键的β-碳，形成稳定的C–S共价键，从而实现高度定点的巯基标记。此反应无需催化剂，速度快，通常几分钟至数十分钟即可完成。
一旦形成硫醚键，该键在生理条件下具有高稳定性，不会自发断裂，因此标记产物可用于细胞实验甚至体内应用。同时，生物素片段可用于后续亲和富集、固定化或检测，UV-Tracer可用于HPLC尺度下监控偶联效率，方便质量控制。
该分子具有以下优势：
高选择性：几乎只与巯基反应，不与氨基或羟基反应；
高灵敏度：UV吸收便于检测微量产物；
易于纯化：生物素-亲和素体系可实现高效分离；
结构小，不破坏蛋白功能；
适合制备生物偶联物、纳米探针或交联聚合物。
产品名称：UV-Tracer Biotin Mal（1628028-96-5）
纯度：95%+
规格：mg/g

用途：科研

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仅用于科研，不能用于人体。小编axc