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Sulfo-Cy3-FAPI-4可实现靶向探针功能及荧光可视化
Sulfo-Cy3-FAPI-4 是将水溶性荧光染料 Sulfo-Cy3 与肿瘤靶向小分子 FAPI-4 共价偶联的功能化化合物,结合了 FAPI-4 对肿瘤相关成纤维细胞 FAP 的高特异性识别能力和 Sulfo-Cy3 的明亮荧光信号。Sulfo-Cy3 具有激发峰约 550 纳米、发射峰约 570 纳米,良好的光稳定性及水溶性,使其适用于活细胞和体内成像实验。FAPI-4 模块提供肿瘤微环境靶向识别能力,通过化学偶联策略,Sulfo-Cy3-FAPI-4 可实现靶向探针功能及荧光可视化。
Sulfo-Cy3-FAPI-4 的反应步骤主要基于 NHS 酯偶联原理。首先,Sulfo-Cy3 通常以 N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS ester)形式提供活性末端,能够与 FAPI-4 分子中的自由氨基发生亲核取代反应,形成稳定的酰胺键。反应前需将 FAPI-4 溶解于缓冲液中,常用 pH 7.5–8.5 的碳酸盐或磷酸盐缓冲体系,保证氨基处于非质子化状态以增强亲核性,同时保持分子稳定。
随后,将 Sulfo-Cy3-NHS 以适当摩尔比缓慢加入 FAPI-4 溶液中,在室温下搅拌反应 2–4 小时。整个反应过程中需避光操作,防止 Sulfo-Cy3 荧光基团光降解,同时可加入少量水溶性有机溶剂如 DMF 或 DMSO 以改善 Sulfo-Cy3 溶解性。反应完成后,混合体系中含有未反应的 Sulfo-Cy3、未修饰 FAPI-4 及副产物,需要进行纯化。
纯化步骤通常采用高效液相色谱(HPLC)或凝胶渗透色谱。反相 HPLC(C18 柱)常用水-乙腈梯度洗脱,并可加入少量三氟乙酸以改善峰形和分离度。通过纯化,可以获得高纯度的 Sulfo-Cy3-FAPI-4 干粉或溶液产品,去除游离染料及副产物。
纯化后,需要通过表征确认偶联成功。质谱(MALDI-TOF 或 ESI-MS)可检测分子量是否符合预期,紫外-可见光谱和荧光光谱可验证 Sulfo-Cy3 的光学特性是否保持完整,同时可用 HPLC 检测纯度。功能验证方面,可通过细胞实验观察 Sulfo-Cy3-FAPI-4 对 FAP 高表达肿瘤细胞的结合能力及荧光信号强度,从而确认靶向性和生物活性。
产品名称:Sulfo-Cy3-FAPI-4
纯度:95%+
规格:mg/g
Sulfo-Cy3-FAPI-4 是将水溶性荧光染料 Sulfo-Cy3 与肿瘤靶向小分子 FAPI-4 共价偶联的功能化化合物,结合了 FAPI-4 对肿瘤相关成纤维细胞 FAP 的高特异性识别能力和 Sulfo-Cy3 的明亮荧光信号。Sulfo-Cy3 具有激发峰约 550 纳米、发射峰约 570 纳米,良好的光稳定性及水溶性,使其适用于活细胞和体内成像实验。FAPI-4 模块提供肿瘤微环境靶向识别能力,通过化学偶联策略,Sulfo-Cy3-FAPI-4 可实现靶向探针功能及荧光可视化。
Sulfo-Cy3-FAPI-4 的反应步骤主要基于 NHS 酯偶联原理。首先,Sulfo-Cy3 通常以 N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS ester)形式提供活性末端,能够与 FAPI-4 分子中的自由氨基发生亲核取代反应,形成稳定的酰胺键。反应前需将 FAPI-4 溶解于缓冲液中,常用 pH 7.5–8.5 的碳酸盐或磷酸盐缓冲体系,保证氨基处于非质子化状态以增强亲核性,同时保持分子稳定。
随后,将 Sulfo-Cy3-NHS 以适当摩尔比缓慢加入 FAPI-4 溶液中,在室温下搅拌反应 2–4 小时。整个反应过程中需避光操作,防止 Sulfo-Cy3 荧光基团光降解,同时可加入少量水溶性有机溶剂如 DMF 或 DMSO 以改善 Sulfo-Cy3 溶解性。反应完成后,混合体系中含有未反应的 Sulfo-Cy3、未修饰 FAPI-4 及副产物,需要进行纯化。
纯化步骤通常采用高效液相色谱(HPLC)或凝胶渗透色谱。反相 HPLC(C18 柱)常用水-乙腈梯度洗脱,并可加入少量三氟乙酸以改善峰形和分离度。通过纯化,可以获得高纯度的 Sulfo-Cy3-FAPI-4 干粉或溶液产品,去除游离染料及副产物。
纯化后,需要通过表征确认偶联成功。质谱(MALDI-TOF 或 ESI-MS)可检测分子量是否符合预期,紫外-可见光谱和荧光光谱可验证 Sulfo-Cy3 的光学特性是否保持完整,同时可用 HPLC 检测纯度。功能验证方面,可通过细胞实验观察 Sulfo-Cy3-FAPI-4 对 FAP 高表达肿瘤细胞的结合能力及荧光信号强度,从而确认靶向性和生物活性。
产品名称:Sulfo-Cy3-FAPI-4
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研

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