SYBR Green I分子能选择性地与双链DNA（dsDNA）结合，而与单链DNA或RNA的亲和力较低。在与DNA结合后，其荧光强度可增强数百倍，使其能在极低核酸浓度下实现灵敏检测。激发波长约为497 nm，发射峰在520 nm左右，荧光呈绿色，适用于常见的荧光检测仪、凝胶成像系统及实时荧光PCR平台。

在qPCR体系中，SYBR Green I可直接掺入反应液中，用于监测DNA扩增过程中的荧光信号变化，从而实现实时定量分析。其优点包括：无需特异性探针、信号强度高、扩增产物检测直观等。实验者可通过溶解曲线分析判断扩增特异性，避免假阳性干扰。此外，SYBR Green I还适用于琼脂糖凝胶电泳后核酸染色，可替代传统的溴化乙锭（EB）染料，具有更高的安全性与灵敏度。

在使用时，应将储备液按实验需求稀释至1×工作浓度。为保持活性和信号稳定性，建议避免强光照射及反复冻融。储存条件为避光、低温（–20°C）密封保存。溶液颜色一般呈浅黄色至黄绿色，使用前可轻微混匀，不建议剧烈振荡。

总体而言，SYBR Green I（10000× in DMSO）是一种高效、灵敏、操作简便的DNA专用荧光染料，广泛适用于qPCR、DNA定量检测、电泳成像等分子生物学研究，为核酸分析提供了可靠的荧光信号支持。