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中文名称:花青素CY2-活性酯
英文名称:NHS-CY2
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
保存:冷藏
供应:西安瑞禧生物科技有限公司

花青素CY2-活性酯(NHS-CY2,Cyanine2 NHS Ester)是一种以Cyanine2(简称Cy2)为核心结构的高效荧光染料衍生物,其特征在于末端含有N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活性酯基团。该活性酯能够与分子中的伯胺或仲胺基团发生特异性共价反应,从而实现荧光染料与生物分子(如蛋白质、肽、多糖、聚合物或纳米载体)的高效偶联。
在结构上,CY2属于经典的Cyanine染料家族,由两端的吲哚阳离子通过亚甲基桥相连形成共轭体系,具有较强的光吸收与发射能力。CY2通常的激发波长约为490 nm,发射峰在510 nm左右,呈现明亮的绿色荧光,与FITC(荧光素异硫氰酸酯)的光谱性质相似,但具有更好的光稳定性与较低的自荧光干扰。NHS-CY2在有机溶剂或适度碱性水溶液中稳定,可通过标准的胺反应体系(pH 7.5–8.5)与目标分子进行标记反应,反应后产物具有高荧光强度和优良的水溶性。
一、合成与反应原理
CY2染料通过吲哚类化合物的缩合与季铵化反应获得核心骨架。随后在染料分子的一端引入羧基,并进一步与N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)在碳二亚胺(如DCC或EDC)的催化下反应生成NHS活性酯结构。该NHS酯在温和条件下极易与含有氨基的生物分子反应,形成稳定的酰胺键,实现共价标记。整个反应步骤温和、选择性高,不会破坏蛋白质或肽链的空间结构。
二、光学与物理化学特性
NHS-CY2的吸收峰通常位于490 nm附近,发射峰在510–520 nm之间,量子产率较高,荧光明亮,信噪比优异。与FITC相比,CY2具有更高的光漂白耐受性和更窄的发射光谱带宽,因而在多色成像实验中能够与其他荧光染料如Cy3、Cy5等形成良好的光谱区分。其分子带有正电荷与疏水结构段,可通过与PEG或其他亲水分子的共轭提高溶解度与稳定性。
三、生物偶联与应用领域
蛋白质和抗体标记:NHS-CY2能够与蛋白质分子中的赖氨酸残基氨基反应,形成共价键,常用于免疫荧光染色、Western blot、流式细胞术和免疫组化。标记后的蛋白保留生物活性,荧光信号强度稳定。
多肽与核酸探针修饰:CY2-活性酯可用于肽链或寡核苷酸的氨基末端标记,构建荧光探针,用于酶反应检测、受体结合研究或核酸杂交成像。
纳米材料与药物载体功能化:通过与氨基修饰的纳米颗粒(如氨基-PEG、氨基-SiO₂或氨基-脂质体)反应,可将CY2荧光标签引入纳米系统中,实现实时示踪、药物释放监测或细胞内分布研究。
细胞与组织成像:CY2的光谱性质使其非常适合激光共聚焦显微镜的绿色通道检测,荧光稳定且信号强,可用于活细胞标记或组织切片成像。
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