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CY3标记牛磺酸,CY3-Taurine

时间:2025-11-03 09:26:16       浏览:90
CY3标记牛磺酸,CY3-Taurine

CY3-标记牛磺酸(CY3-Taurine)是将羧基/活化的CY3衍生物与牛磺酸分子上的氨基发生偶联得到的荧光示踪分子,常用于细胞示踪、转运研究和结合位点定位。CY3发射在可见光区,便于荧光显微与光谱定量;牛磺酸具有亲水性和带电性,可保持分子在生物体系中的分布特性。

制备方法(概述):
1)试剂与溶剂:牛磺酸(高纯)、CY3-NHS酯(或CY3-succinimidyl ester,商业可得)、碳酸氢钠/碳酸钠缓冲或PBS(pH ~8.0–8.5),含少量有机溶剂如DMSO或DMF以溶解CY3-NHS,去离子水。所有操作避光,在低温下进行可提高产率并减少染料降解。
2)配比与溶解:将牛磺酸溶于碱性缓冲(pH 8.0–8.5),浓度取1–10 mM;CY3-NHS先溶于少量干燥DMSO制成母液,随后以1.2–2倍当量加入牛磺酸溶液中,溶液总体有机相不超过10–20%(体积比)。
3)偶联反应:于室温或4 ℃下避光搅拌反应1–4小时(依染料活性与浓度可延长至过夜),保持pH在8左右以促进胺-NHS酯反应并抑制水解。可通过小取样用薄层色谱(TLC,若适用)、紫外-可见光谱或液相色谱监控反应进程。
4)终止与去除未反应染料:反应完成后用甘氨酸或氨水微量终止未消耗的NHS酯,随后通过透析(针对水溶性产物)、凝胶过滤柱(如Sephadex G-25)或反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离纯化标记产物与过量染料、低分子副产物。
5)表征:收集纯化产物并用UV-Vis测定吸收峰(CY3典型峰位约550–560 nm),用荧光光谱测发射峰,用质谱(ESI-MS)确认加标后的分子量。必要时可用核磁共振(若样品浓度与溶剂允许)或元素分析进一步验证。
6)贮存与稳定性:将纯品分装避光保存于-20 ℃或4 ℃(取决于长期稳定性测试),溶液样品建议在低温、避光、含抗氧化剂(如少量抗坏血酸)条件下短期保存。实验使用时注意避免反复冻融与强光照射。

注意事项:整个制备过程须避光并使用干净无菌玻璃器皿以减少有机物干扰;调节pH时避免过碱(会加速染料分解)或过酸(不利于胺与NHS酯反应)。纯化步骤选择应基于最终用途(生物学应用建议彻底去除游离染料)。若用于细胞或动物实验,事先进行细胞毒性与背景荧光评估。

瑞禧生物供应磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、磁性纳米颗粒、纳米金、近红外荧光染料、荧光量子点、碳纳米管、石墨烯及多种功能高分子材料。如有需求可咨询
产品名称:CY3标记牛磺酸,CY3-Taurine
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研

厂家:瑞禧生物


产品目录

CY3标记万古霉素 CY3-Vancomycin
CY3标记维生素B12 Cy3-B12
CY3标记五聚精氨酸  CY3-R5
CY3标记细胞穿膜肽PENE  CY3-PENE

仅用于科研,不能用于人体。小编axc
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