四甲基罗丹明B-异氰酸酯（Tetramethylrhodamine B isothiocyanate，简称TMR-B-IC）是一种常用的荧光标记试剂，属于罗丹明类染料衍生物，其结构特点在于罗丹明B核心上保留了多甲基取代的氨基，并在适当位置引入活泼的异氰酸酯官能团，使其能够与含氨基的生物分子如蛋白质、肽链或氨基化小分子进行共价偶联。四甲基罗丹明B-异氰酸酯在分子水平上具有典型的共轭芳香体系，中心的罗丹明骨架提供强烈的橙红色荧光，而异氰酸酯基团（–N=C=O）则为化学反应提供活性位点，使其在生物标记和分子探针构建中应用广泛。该化合物在有机溶剂如二甲基亚砜、N,N-二甲基甲酰胺或乙醇中具有良好溶解性，而在水中溶解性有限，需要通过缓冲体系或有机溶剂混合体系进行使用。

四甲基罗丹明B-异氰酸酯的制备方法通常基于对罗丹明B氨基衍生物的异氰化改性。首先需要合成或获得四甲基罗丹明B胺，即在罗丹明B核心结构上引入甲基化的氨基官能团。该步骤可通过甲基化反应实现，通常使用甲醛和还原剂或甲基碘在适当溶剂中完成。得到的四甲基罗丹明B胺在干燥的有机溶剂中进一步进行异氰化反应，将胺官能团转化为异氰酸酯。常用的异氰化试剂包括硫代氰酸酯或氯异氰酸酯，在温和条件下与四甲基罗丹明B胺反应生成四甲基罗丹明B-异氰酸酯。反应过程中通常在低温或室温下进行，以避免荧光核心的降解，同时使用干燥的有机溶剂如二氯甲烷或四氢呋喃以减少水分对异氰酸酯活性的影响。生成的异氰酸酯化产物可通过柱层析、重结晶或薄层色谱进行纯化，以去除未反应的前体和副产物，保证产物的纯度和荧光性能。

在制备过程中，需要注意异氰酸酯基团对水和氨的敏感性，储存和操作通常在干燥、低温条件下进行，并避免长时间暴露于空气中，以防止水解生成相应的胺或碳酸衍生物。纯化后的四甲基罗丹明B-异氰酸酯在结构上表现为罗丹明B共轭体系与异氰酸酯基团的共存，能够在氨基化底物存在时发生亲核加成反应形成稳定的硫脲或脲类共价键，从而实现蛋白质、肽链或其他氨基化分子的标记。其光谱性质包括橙红色荧光，激发峰一般在540至560纳米范围，发射峰在570至590纳米，光稳定性较好，适用于荧光显微镜、流式细胞分析及其他生物分子检测应用。

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AF647-Ellagic acid AF647标记鞣花酸
AF647-Enrofloxacin AF647标记恩诺沙星
AF647-GE11 AF647标记GE11肽
AF647-HAIYPRH AF647标记转铁蛋白靶向肽
AF647-Ivermectin AF647标记伊维菌素