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AT 590 Succinimidyl Ester的生物应用场景

时间:2025-11-07 15:03:27       浏览:90
产品名称:AT 590 Succinimidyl Ester的生物应用场景
1. 生物应用场景
蛋白质/抗体标记:用于免疫荧光、流式细胞术、Western Blot及ELISA中,标记抗体或酶(如HRP)实现目标蛋白定量检测。
核酸探针设计:标记胺修饰的寡核苷酸,用于荧光原位杂交(FISH)、基因表达分析及CRISPR-Cas9编辑效率监测。
细胞成像与追踪:穿透细胞膜,标记细胞表面受体或内部分子,适配共聚焦显微镜、活细胞动态追踪及超分辨成像。
FRET与能量转移:作为供体/受体用于荧光共振能量转移实验,研究分子间相互作用及构象变化。
药物递送与靶向:结合靶向配体(如抗体、适配体)标记纳米载体,实现肿瘤靶向递送及体内分布追踪。
2. 操作规范与实验流程
储存条件:-20℃避光干燥保存,避免反复冻融;运输需冰袋保护。工作液现配现用,溶解于无水DMSO或DMF(终浓度1-10 mM),水相反应需无水环境。
反应条件:
缓冲体系:pH 7-9的碳酸盐/硼酸盐缓冲液,避免含胺缓冲液(如Tris);蛋白质浓度2-10 mg/mL,染料:蛋白摩尔比3:1(可优化至1.2-2:1)。
反应温度与时间:室温(25℃)反应1-4小时,或4℃过夜;抗体标记建议4℃过夜以提升效率。
终止与纯化:加入甘氨酸/Tris淬灭未反应染料,通过透析、凝胶过滤或HPLC去除游离染料;核酸标记可采用乙醇沉淀或HPLC纯化。
避光操作:全程使用铝箔包裹容器,控制光照强度与时间,防止荧光淬灭。
3. 稳定性与质量控制
化学稳定性:耐高温(至40℃)、抗酶解,但需避免极端pH或重金属离子(如Cu²⁺)导致降解。
光稳定性管理:添加抗氧化剂(如维生素C)延缓光漂白;避免持续激光照射,控制成像时间。
验证方法:
荧光验证:紫外灯下观察荧光信号,或通过荧光光谱仪检测激发/发射波长偏移。
纯度验证:SDS-PAGE分析标记蛋白迁移率变化,HPLC检测纯度≥95%。
活性验证:流式细胞术或共聚焦显微镜评估标记效率及生物活性保留。


关于我们:
西安瑞禧生物科技有限公司经营的产品种类包括有:近红外荧光染料、点击化学产品、合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯,二氧化硅及介孔二影产品,荧光蛋白及荧光探针等,欢迎咨询。


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