CY5-乳酸氧化酶（CY5-Lactate Oxidase）是一种将近红外荧光染料CY5与乳酸氧化酶（Lactate Oxidase, LOx）通过共价偶联形成的功能化酶标记分子。该分子结合了CY5的光学可视化能力和乳酸氧化酶的催化活性，实现乳酸代谢检测与荧光追踪的整合，为生物化学分析、代谢监测及药物研究提供可靠工具。CY5骨架提供激发波长约650 nm、发射波长约670 nm的近红外荧光，可用于体外和体内实验中的低背景信号成像，而乳酸氧化酶可催化乳酸氧化生成丙酮酸和过氧化氢，实现生物化学反应信号的放大。

CY5-乳酸氧化酶的反应条件设计旨在保证酶活性和荧光性能的兼顾。偶联反应通常选择在温和的缓冲体系中进行，如PBS缓冲液（pH 7.2–7.6），以维持酶的构象稳定和催化功能。反应温度一般控制在4–25摄氏度，避免高温导致酶失活或CY5染料光漂白。CY5的活性官能团一般为NHS酯或异硫氰酸基（–N=C=S），可与乳酸氧化酶分子表面赖氨酸残基的氨基形成稳定的共价键，如酰胺键或硫脲键。通过调整CY5与酶的摩尔比，可控制偶联程度，平衡荧光强度与酶活性，避免过度偶联造成酶构象改变或催化效率下降。

偶联反应通常在缓冲液中缓慢搅拌进行2–12小时，以保证均匀反应。反应过程中可加入少量有机溶剂（如DMSO）以增加CY5的溶解度，但需严格控制比例（一般低于5%），以避免酶失活。反应结束后，通过纯化方法去除未反应的自由CY5染料和副产物，常用方法包括凝胶过滤、透析或反相高效液相色谱（HPLC）。纯化后的CY5-乳酸氧化酶呈水溶性、稳定分散，荧光信号强且酶催化活性保持良好，可直接用于生物实验。

CY5-乳酸氧化酶的反应条件还包括对pH和离子强度的优化。缓冲液pH需接近中性或微碱性，既保证NHS酯与氨基的亲核反应效率，又维持乳酸氧化酶的天然构象。离子强度适中，可通过NaCl或KCl调节，避免高盐环境破坏蛋白质构象或影响染料分散。偶联反应中可加入微量抗氧化剂（如抗坏血酸）以防止CY5染料氧化失活，同时提高产物稳定性。

通过上述温和、可控的反应条件，CY5-乳酸氧化酶能够保持近红外荧光强度和酶催化活性，实现乳酸检测的荧光可视化。该偶联物可用于体外乳酸浓度测定、细胞培养体系代谢监测以及体内代谢成像。CY5荧光信号可与酶催化产生的过氧化氢反应体系联用，构建荧光响应系统，从而提高检测灵敏度和信噪比，实现动态、定量的乳酸监测。

综上所述，CY5-乳酸氧化酶是将近红外荧光标记与酶催化功能结合的多功能分子。其反应条件设计强调温和缓冲、pH适宜、温度可控以及摩尔比调节，以保证酶活性和荧光性能兼顾。偶联过程中通过NHS酯或异硫氰酸基与酶氨基形成稳定共价键，纯化后获得水溶性稳定产物。CY5-乳酸氧化酶在生物代谢监测、荧光成像及药物研究中具有重要实验应用价值，可实现乳酸检测的高灵敏可视化分析。

厂家：瑞禧生物

产品目录

CY7.5-Hyaluronate，CY7.5标记透明质酸的
CY7.5-Hylauronic-acid，CY7.5标记透明质酸的
CY7.5-Desthiobiotin，CY7.5标记脱硫生物素的
CY7.5-Vancomycin，CY7.5标记万古霉素的
CY7.5-Cytochrome-C，CY7.5标记细胞色素C的