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Streptavidin, Alexa Fluor 647 conjugate的合成与质量控制

时间:2025-11-10 15:53:19       浏览:135
产品名称:
1. 核心化学结构与荧光特性
1.1 链霉亲和素(Streptavidin)
结构特性:四聚体糖蛋白(分子量约60 kDa),由四个相同亚基组成,每个亚基含一个生物素结合位点(结合常数Kd≈10⁻¹⁵ M),形成高稳定性非共价复合物。
功能优势:耐高温、去污剂及极端pH(5-9),保留生物素结合活性,兼容多样本处理条件。
1.2 Alexa Fluor 647 荧光染料
光谱特性:激发波长647 nm,发射波长668 nm(近红外区域),消光系数高,量子产率良好,光稳定性强。
化学修饰:磺酸基团增强水溶性,通过NHS酯活化与链霉亲和素赖氨酸残基共价偶联,形成稳定酰胺键。
近红外优势:发射波长位于生物组织“光学窗口”(650-900 nm),减少自发荧光干扰,提升信噪比,适用于深层组织成像。
2. 合成与质量控制
2.1 合成路径
偶联反应:链霉亲和素溶于碳酸盐缓冲液(pH 8.3-8.5),与Alexa Fluor 647-NHS酯(溶于DMSO/DMF)在室温下反应1-4小时,摩尔比3-10:1(染料:蛋白),避免过度标记影响生物素结合能力。
纯化验证:通过透析、凝胶过滤(如Sephadex G-25)或高速离心去除游离染料;HPLC纯度≥95%,游离染料残留<5%。
结构确认:质谱分析分子量,核磁共振验证化学键,荧光光谱测定激发/发射波长。
2.2 质量控制
生物活性:流式细胞术验证生物素结合能力,免疫荧光检测信号强度。

批次一致性:通过酶联免疫吸附试验(ELISA)或生物传感器评估偶联效率与稳定性。


关于我们:
西安瑞禧生物科技有限公司经营的产品种类包括有:近红外荧光染料、点击化学产品、合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯,二氧化硅及介孔二影产品,荧光蛋白及荧光探针等,欢迎咨询。


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