Cyanine3酪酰胺（Cyanine3 Tyramide，简称Cy3-TSA，CAS号174961-75-2）是一种基于Cyanine3荧光染料的酪胺信号放大试剂（Tyramide Signal Amplification, TSA）。该化合物由Cyanine3荧光团与酪胺结构共价连接而成，在辣根过氧化物酶（HRP）催化下可被氧化生成活性自由基，与样品中存在的酚羟基或酪氨酸残基发生共价结合，从而将荧光团永久固定在目标位置。Cy3-TSA结合了Cyanine3明亮的橙红色荧光与TSA体系的高放大能力，广泛应用于免疫荧光染色、免疫组化、原位杂交（ISH）和信号检测等生物实验中。

Cyanine3是一种常用的有机荧光染料，激发峰约为550纳米，发射峰约为570至580纳米，呈橙红色荧光。该染料具有高量子产率、良好的光稳定性和较强的信号亮度，适合使用常见的绿色激光器（如532或543纳米）进行激发检测。与传统荧光素（FITC）相比，Cyanine3在光漂白抗性和信噪比方面更为优越。Cy3-TSA在保留Cyanine3光学性质的基础上，通过酪胺的可反应性实现酶促信号放大，使其能够在低靶标浓度条件下产生强烈且稳定的荧光信号。

实验用途

Cy3-TSA的核心用途在于酶促信号放大标记，其原理基于HRP催化的酪胺氧化反应。在典型实验中，研究者首先利用HRP标记的抗体或探针识别目标分子，随后加入Cy3-TSA和过氧化氢。HRP催化过氧化氢分解生成活性氧化物种，将酪胺氧化为短寿命自由基，该自由基能与邻近的酚环或酪氨酸残基形成共价键，从而将Cyanine3荧光团牢固地附着在目标区域。由于每个HRP酶分子可以催化大量酪胺结合反应，因此荧光信号可被放大几十到上百倍。

在**免疫荧光染色（Immunofluorescence, IF）**实验中，Cy3-TSA常用于检测低丰度或难以直接可视化的蛋白分子。例如在细胞或组织切片中，通过使用HRP偶联的二抗结合目标一抗后，再引入Cy3-TSA进行反应，可以获得比直接荧光标记更高的信号亮度和更低的背景噪声。由于酪胺共价结合的稳定性，Cy3-TSA标记后的信号可在多次洗涤后仍然保持清晰不衰减，非常适合需要高分辨率成像的实验。

在**免疫组化（Immunohistochemistry, IHC）**应用中，Cy3-TSA能够实现荧光方式的信号放大。它可与其他不同颜色的TSA试剂（如AF488-TSA、Cy5-TSA等）配合使用，实现多重染色。在这种多通道标记策略中，每一轮反应后需对HRP进行失活或阻断，以防止交叉反应。Cyanine3发射光谱位于中波段，可与绿色、远红或近红通道染料区分开，因此常被用作三重或四重荧光检测体系中的中间通道。

在原位杂交（In Situ Hybridization, ISH）及RNA检测中，Cy3-TSA用于信号增强。通过将HRP标记的核酸探针与目标RNA或DNA序列结合，再利用Cy3-TSA反应，可显著提高信号检测灵敏度。这种方法常用于检测组织或细胞中低拷贝RNA分子、转录因子mRNA以及病毒核酸。由于Cyanine3荧光信号明亮且稳定，适合激光共聚焦显微镜、扫描显微镜和荧光切片成像系统的检测。

在Western blot或膜上检测中，Cy3-TSA也可作为高灵敏度的荧光底物。通过与HRP标记抗体反应，膜上可形成强烈的红色荧光带，使用荧光扫描仪可直接定量检测，替代传统的化学发光法。该方法信号线性范围广，适合进行多样品比较和定量分析。

此外，Cy3-TSA在多重成像与共定位研究中具有优势。由于其发射光谱与常见的DAPI（蓝色）、Alexa Fluor 488（绿色）及Cy5（远红）染料区分明显，可在同一样本中实现多靶点同时检测。其光稳定性和信号持续时间也有利于长期观测和三维重建成像。

厂家：瑞禧生物

产品目录

CY7标记褪黑素 CY7-Melatonin
CY7标记脱硫生物素 CY7-Desthiobiotin
CY7标记万古霉素 CY7-Vancomycin
CY7标记蜗牛酶 CY7-Snailase
CY7标记细胞色素C CY7-Cytochrome-C