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X-Rhodamine maleimide,ROX 马来酰亚胺的反应机制与选择性

时间:2025-11-14 15:38:48       浏览:155
产品名称:X-Rhodamine maleimide,ROX 马来酰亚胺的反应机制与选择性
1. 反应机制与选择性
反应原理:马来酰亚胺基团与生物分子中的巯基(-SH,如半胱氨酸残基)在弱碱性条件(pH 6.5-7.5)下发生迈克尔加成反应,形成稳定硫醚键。反应速率在pH 7.0时,巯基反应速率比氨基快约1000倍,确保高特异性。
选择性优势:
巯基靶向性:优先与游离巯基反应,避免与氨基、羟基等非巯基官能团交叉反应,适用于蛋白质、肽链、抗体等生物分子的精准标记。
生物正交潜力:可与生物正交基团(如叠氮、炔基)联用,实现点击化学标记(如CuAAC、SPAAC),提升标记特异性。
2. 生物相容性与应用场景
生物相容性:低细胞毒性,代谢产物无毒,可通过肾脏快速清除;在生理pH(4-10)及温度范围内稳定,兼容活细胞/活体实验,对离子强度、氧化还原状态耐受性强。
应用场景:
生物分子标记:标记抗体、核酸探针(如FISH探针)、糖蛋白等,用于免疫荧光、Western blot、流式细胞术(FACS)、ELISA等实验。
细胞成像:共聚焦显微镜、超分辨显微镜(如STED/PALM)中追踪细胞器(如线粒体、溶酶体)、细胞膜蛋白及亚细胞结构(如细胞骨架、内吞体)。
多色标记:与绿色(如FITC)、蓝色(如DAPI)或近红外染料联用,实现多通道荧光成像及共定位研究(如蛋白质互作、信号通路分析)。
药物递送:修饰纳米颗粒(如脂质体、量子点)或抗体-药物偶联物(ADCs),用于靶向递送及药物释放监测。
分子诊断:作为荧光探针用于实时PCR、FRET实验、酶活性检测及单分子检测。
3. 操作与储存规范
反应条件:弱碱性缓冲液(如PBS pH 7.5-8.5),室温避光孵育1-4小时;染料与蛋白摩尔比建议5:1至20:1,避免过度标记导致荧光猝灭。
纯化步骤:反应后通过超滤、HPLC或凝胶过滤层析(如Sephadex G-25)去除游离染料,确保标记效率。
储存条件:-20℃避光干燥保存,分装小管避免反复冻融;溶液现配现用(DMSO溶解后稀释至缓冲液)。
安全规范:仅用于科研/工业用途,非医疗/食用;操作需佩戴防护装备(手套、护目镜),废弃物按实验室危险废物处理。


关于我们:
西安瑞禧生物科技有限公司经营的产品种类包括有:近红外荧光染料、点击化学产品、合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯,二氧化硅及介孔二影产品,荧光蛋白及荧光探针等,欢迎咨询。


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