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Texas Red maleimide,德州红-马来酰亚胺的反应机制与条件优化

时间:2025-11-14 15:57:18       浏览:1
产品名称:Texas Red maleimide,德州红-马来酰亚胺的反应机制与条件优化
1. 反应机制与条件优化
反应原理:马来酰亚胺基团与生物分子中的巯基(-SH)在弱碱性条件(pH 7.5-8.5)下发生特异性加成反应,形成稳定硫醚键。反应需避免含巯基(如DTT)或伯胺(如Tris)的缓冲液干扰。
条件优化:
缓冲体系:推荐PBS、HEPES或碳酸氢钠缓冲液。
温度与时间:室温(25℃)或4℃反应30分钟至2小时,高温易导致马来酰亚胺水解。
试剂比例:目标分子巯基与马来酰亚胺摩尔比1:1至1:10,高比例提升标记效率。
纯化与稳定性:反应后通过透析、凝胶过滤或HPLC去除未反应试剂;产物需-20℃至-30℃避光保存,避免反复冻融。
2. 应用场景与优势
生物成像与检测:
蛋白质/抗体标记:用于免疫荧光、流式细胞术、Western Blot及蛋白质相互作用分析。
核酸标记:标记硫醇修饰的寡核苷酸,应用于FISH(荧光原位杂交)、实时PCR及基因测序。
活细胞/组织成像:标记细胞膜蛋白、细胞器(如线粒体),适配共聚焦显微镜、超分辨成像(如STORM/PALM)及小动物活体成像。
药物递送与纳米医学:标记抗体-药物偶联物(ADC)、脂质体或聚合物纳米颗粒,实现靶向递送与疗效追踪。
信号放大技术:结合酪胺信号放大(TSA)技术,通过HRP催化自由基沉积,提升低丰度蛋白检测灵敏度(信噪比提升10-100倍)。
优势特点:
高灵敏度与低背景:橙红-近红外发射减少生物自发荧光干扰,适合低丰度蛋白检测。
特异性:马来酰亚胺与巯基的高选择性反应,减少非特异性结合。
生物相容性:适配活细胞实验,兼容多色成像(如与FITC/Cy5联用)。


关于我们:
西安瑞禧生物科技有限公司经营的产品种类包括有:近红外荧光染料、点击化学产品、合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯,二氧化硅及介孔二影产品,荧光蛋白及荧光探针等,欢迎咨询。


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