NH2-PEG-Cy5 的中文名称可称为 氨基聚乙二醇-Cy5，是一种功能化荧光分子，由氨基末端、PEG 链段和 Cy5 染料组成。该分子兼具氨基的化学反应活性、PEG 链的柔性与亲水性以及 Cy5 的远红光荧光特性，常用于生物分子标记、荧光成像以及生物材料改性。Cy5 作为染料核心，具有激发波长约 650–670 nm，发射波长约 670–690 nm 的远红光特性，光稳定性良好、摩尔吸光系数高。PEG 链段通常为线性或支链聚乙二醇，可提供柔性连接臂，减少染料自聚或非特异性结合。氨基端的存在使分子能够与羧基、活化酯或其他可反应基团高效偶联，为后续生物或化学修饰提供活性位点。

在分子结构上，NH2-PEG-Cy5 可表示为 NH2–PEG–Cy5，其中氨基端通常位于 PEG 链的一端，而 Cy5 染料通过羧基或其他功能基团连接在 PEG 另一端。PEG 链长度可调，一般在 1–5 kDa 范围内，以满足溶解性、柔性和空间隔离需求。Cy5 染料与 PEG 连接的方式一般通过酰胺键或酯键形成，保证染料光学性能不受影响。氨基端保留良好活性，可与羧基活化酯、环氧化物或异氰酸酯反应，形成稳定共价连接。

NH2-PEG-Cy5 的合成通常包括以下步骤：

1. Cyanine5 染料活化
   选择 Cy5 染料，其羧基端通过活化形成 NHS 酯或其他可反应中间体。NHS 酯化反应常在无水或低水环境中进行，使用二甲基亚砜（DMSO）或二氯甲烷等溶剂，并加入适量碱（如三乙胺）以促进酯化。活化后染料能够与氨基末端的 PEG 高效偶联，同时保持染料光学性质和结构完整。

2. PEG 链连接
   活化后的 Cy5 与氨基功能化的 PEG 反应形成 Cy5–PEG 中间体。反应条件温和，通常在室温下或轻微加温条件下完成，溶剂可为有机溶剂或缓冲体系。PEG 链提供柔性间隔，使染料和氨基端分离，避免空间阻碍对反应的影响，同时提高溶解性和分散性。

3. 氨基保留与修饰准备
   PEG 链另一端保留氨基，确保后续可与目标分子进行偶联反应。整个过程在温和条件下进行，避免高温、强酸或强碱环境，保护染料结构和氨基活性。

纯化步骤是确保 NH2-PEG-Cy5 高纯度的重要环节。常用方法包括：

• 高效液相色谱（HPLC）：通过反相或正相 HPLC 分离未反应染料、PEG 或副产物，获得高纯度产物。

• 透析或凝胶过滤：去除低分子量杂质和小分子副产物，尤其适用于水溶性 PEG 体系。

• 冻干处理：纯化后产物常通过冻干形成稳定粉末，便于长期保存和后续使用。

表征方法包括紫外-可见光谱和荧光光谱，用于确认 Cy5 的光学特性保持完整；质谱分析（MS）确认分子量和结构完整性；必要时使用核磁共振（NMR）验证 PEG 链和染料连接的正确性。溶解性和稳定性测试也常用于评估在缓冲液或水相环境中的适应性。

厂家：瑞禧生物

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IR1048-DBCO
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IR1048-Maleimide
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IR1048-Me-Tetrazine
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