Hoechst 33342 属于典型的双苯并咪唑结构荧光染料，是 Hoechst 系列中应用十分广泛的一种。其核心骨架包含两个苯并咪唑环，通过氨基取代与柔性链段连接，在空间构型上能够和核酸的特定区域形成匹配。由于这种结构具有较高的选择性，它能够在细胞或组织环境中展示清晰的核区定位，使细胞核在荧光显微系统中呈现明亮信号。

Hoechst 33342 的光谱范围与紫外至蓝光区匹配，激发波段较短，而发射信号位于蓝色至蓝紫范围，因此在多色成像体系中较容易与其他波段染料区隔。其分子可在多种细胞类型中扩散，并在核区逐步富集，不需要经由特定的生化加工即可呈现较高的信号强度。这使其在固定样本、活细胞体系以及多类型材料界面中都具有良好表现。

由于 Hoechst 33342 结构上带有带正电的基团，它与核酸小沟区域之间的吸引力较强。结合后，染料的电子结构发生变化，导致荧光显著增强，从而使核区与其他区域形成明显对比。在不同的体系中，该分子展现出较好的光稳定性，并保持较低的背景干扰，使其成为观察细胞核形态、数量变化以及核酸相关结构分布的可靠工具。

实验用途（非操作性说明）

一、细胞核标记与结构观察
Hoechst 33342 被广泛用于观察细胞核的形态、大小、分布与结构差异。由于其发光强度在核区明显提高，可在显微镜下迅速获得清晰的核区影像，使研究者能够识别细胞排列、核区紧密程度、染色质分布状态等。它适用于多种细胞类型，包括贴壁细胞、悬浮细胞、哺乳动物细胞系以及部分原代细胞。

二、细胞计数与增殖相关分析
在大量细胞计数或分析细胞密度变化时，Hoechst 33342 的高对比信号能够辅助图像软件辨识单个细胞的核区，从而支持统计分析。通过与其他标记相结合，可以用于研究细胞分裂周期变化、核区密度差异或特定刺激条件下细胞数量的动态变化。

三、活细胞观察与时间序列记录
Hoechst 33342 可分散进入活细胞并在短时间内达到核区，因此适合用于活体成像。在保持细胞活力的前提下，可用于观察细胞核随时间发生的变化，例如核区迁移、形态变化或相关结构的空间重组。由于其信号稳定，适用于时间序列成像，从而捕捉动态过程。

四、流式分析中的核区标记
在流式体系中，Hoechst 33342 常作为用于区分细胞群体或评估核酸含量的辅助染料。其信号可用于区分不同细胞周期阶段，因为核酸含量变化与信号强弱之间存在一定关联。通过与其他光谱窗口的染料组合，可实现对细胞群体的多参数识别。

五、干细胞、原代细胞与组织分析
Hoechst 33342 在某些类型的原代细胞和干细胞研究中可用于辅助分类。例如某些群体在染料进入细胞的能力上存在差异，研究者可利用这一特性对混合细胞群进行区分。此外，在组织切片或三维培养体系中，该染料也可作为层级结构分析的工具，用于观察细胞在组织架构中的分布。

六、多色成像体系中的配合使用
Hoechst 33342 的蓝色发射特点使其在多通道成像中与绿色、红色及更长波段染料同时使用时具有较小干扰。这使得它可作为复杂标记体系中的固定标记物，用于提供核区参照点，并辅助校正图像中的位置关系。

七、与环境敏感探针组合的对照工具
在研究局部微环境、膜结构或胞质变化时，Hoechst 33342 可作为稳定的核区对照，为实验提供一个不随实验条件大幅变化的信号基准。通过比较其他探针在不同区域的响应变化，可提高对实验现象的解释能力。

厂家：瑞禧生物

产品目录

ICG-Pyruvic Acid 吲哚菁绿标记丙酮酸
ICG-Quercetin 吲哚菁绿槲皮素
ICG-Rapamycin 吲哚菁绿标记雷帕霉素
ICG-Retapamulin 吲哚菁绿标记瑞他莫林