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Click-iT Plus EdU AF 350的合成路径与工艺优化

时间:2025-11-18 17:04:28       浏览:1
产品名称:Click-iT Plus EdU AF 350的合成路径与工艺优化
1. 核心结构与化学本质
分子组成:
EdU(5-乙炔基-2-脱氧尿苷):胸腺嘧啶类似物,含炔基(-C≡C-),可掺入DNA合成期(S期)细胞,通过点击化学标记新生DNA。
AF 350荧光染料:Alexa Fluor 350,蓝色荧光(激发波长346 nm,发射波长442 nm),高量子产率、低光漂白性,兼容多色成像(如与GFP/RFP联用)。
点击化学连接臂:通过铜催化炔-叠氮环加成(CuAAC)或无铜SPAAC反应,将EdU与AF 350共价偶联,形成稳定三唑环结构。分子量约800-1000 g/mol(具体取决于连接臂长度)。
2. 合成路径与工艺优化
关键步骤:
EdU功能化:EdU的炔基与叠氮化AF 350在CuSO₄/TBTA(三苯基膦配体)催化下,于无水甲醇/水混合溶剂中反应,室温避光1-2小时,产率>80%。
无铜点击化学替代:采用DBCO-AF 350与炔基EdU通过SPAAC反应,避免铜毒性,提升生物相容性。
纯化策略:HPLC或凝胶色谱去除未反应物及副产物,纯度>95%;产物需避光干燥保存,避免反复冻融。
条件优化:溶剂选择无水极性溶剂(如DMSO),pH控制在7.0-8.0,温度25-30℃;引入PEG链减少空间位阻,提升标记效率。
3. 核心应用场景
细胞增殖与DNA合成检测:
流式细胞术/荧光显微镜:标记S期细胞,量化细胞增殖速率,用于肿瘤研究、药物筛选(如化疗药效评估)。
多色成像:与AF488、AF594等染料联用,实现DNA合成、蛋白表达、细胞周期的多参数同步分析。
活细胞动态追踪:结合共聚焦/超分辨显微镜,实时观测DNA复制动态、细胞迁移及分裂过程。
神经科学与发育生物学:
神经发生研究:追踪神经干细胞增殖、分化及神经突生长,用于阿尔茨海默病、帕金森病模型研究。
发育生物学:分析胚胎发育、器官形成中的细胞增殖模式,揭示发育异常机制。
高通量筛选与诊断:
药物筛选:高通量检测细胞增殖抑制/促进作用,用于抗肿瘤药物、免疫调节剂筛选。
临床诊断:辅助评估肿瘤恶性程度、预后监测,或用于病原体感染检测(如病毒复制活性)。


关于我们:
西安瑞禧生物科技有限公司经营的产品种类包括有:近红外荧光染料、点击化学产品、合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯,二氧化硅及介孔二影产品,荧光蛋白及荧光探针等,欢迎咨询。


我们能提供的产品:
DSPE-cRGD 二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-环肽cRGD
DSPE-COOH 二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-羧基
DSPE-Chol 二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-胆固醇
DSPE-CHO 二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-醛基
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