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FITC-羧乙基壳聚糖,荧光素异硫氰酸-羧乙基化壳聚糖的合成及纯化过程

时间:2025-11-20 15:07:03       浏览:99
FITC-羧乙基壳聚糖,荧光素异硫氰酸-羧乙基化壳聚糖的合成及纯化过程

FITC-羧乙基壳聚糖是一种通过共价接枝荧光染料FITC(异硫氰酸荧光素)于羧乙基化壳聚糖(Carboxyethyl chitosan,CECS)形成的水溶性荧光标记聚合物。羧乙基壳聚糖是由壳聚糖衍生化得到的水溶性多糖,保留了氨基和羟基活性位点,增加了溶液稳定性和水溶性。FITC通过异硫氰酸基与羧乙基壳聚糖的自由氨基发生共价结合,形成稳定的脲键,实现荧光标记。该标记物适合在体外体系中进行分子追踪、载体分布研究及溶液动力学分析。

2. 合成过程概述
FITC-羧乙基壳聚糖的合成主要包括以下步骤:

(1)羧乙基壳聚糖溶解
将适量羧乙基壳聚糖溶解于缓冲液中(通常为pH 7–8的磷酸盐缓冲液),使氨基处于非质子化状态,便于与FITC反应。溶液应充分搅拌,直至聚合物完全溶解形成均匀溶液。

(2)FITC溶解与滴加
将FITC溶解于极少量的有机溶剂中(如DMSO)形成浓缩溶液,避免光照对染料造成影响。然后缓慢将FITC溶液滴加到羧乙基壳聚糖溶液中,同时轻轻搅拌,使异硫氰酸基与聚合物的自由氨基发生亲核反应。反应通常在避光条件下进行,温度控制在室温或轻微升温范围(25–37°C),反应时间一般为数小时至过夜,以确保标记效率。

(3)反应条件控制
在反应过程中需保持缓冲液pH稳定,因为过酸或过碱环境均可能降低FITC的活性或影响聚合物结构。轻度搅拌可保证均匀反应,同时避免泡沫生成或聚合物降解。

3. 纯化过程
反应完成后,体系中可能存在未反应的FITC及低分子副产物。纯化方法常包括透析和凝胶过滤:

  • 透析:将反应混合物置于分子量截断合适的透析膜(如1–3 kDa)中,对水或缓冲液进行透析,持续数小时至数天,中途更换透析液,以去除小分子杂质。

  • 凝胶过滤:可进一步使用Sephadex G-25或类似介质进行分离,去除残余小分子,回收荧光标记的聚合物。

纯化过程中应避免强光照射,保持产物荧光稳定。透析或过滤后的产物可通过冻干获得固体形式,便于储存和后续使用。

瑞禧生物供应磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、磁性纳米颗粒、纳米金、近红外荧光染料、荧光量子点、碳纳米管、石墨烯及多种功能高分子材料。如有需求可咨询
产品名称:FITC-羧乙基壳聚糖,
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研

厂家:瑞禧生物


产品目录

ICG-propofol 吲哚菁绿标记丙泊酚
ICG-protopanaxatriol 吲哚菁绿标记人参皂苷
ICG-PTX 吲哚菁绿紫杉醇
ICG-Pyruvic Acid 吲哚菁绿标记丙酮酸

仅用于科研,不能用于人体。小编axc
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