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ATTO 680 NHS Ester,ATTO 680 活性酯的合成步骤概述

时间:2025-11-21 16:12:46       浏览:57
ATTO 680 NHS Ester,ATTO 680 活性酯的合成步骤概述

ATTO 680 NHS Ester 是基于 ATTO 680 荧光染料的功能化分子,其末端含有 N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活性酯,可以与生物分子中的初级胺(–NH₂)共价结合,实现高效标记。ATTO 680 荧光染料属于远红荧光染料,具有高光稳定性、强荧光强度和低背景信号,激发波长约为680 nm,发射波长约为700 nm,适用于蛋白质标记、抗体偶联、活体成像及多通道荧光实验。NHS 酯官能团提供高选择性和高反应活性,使其能够在温和条件下与蛋白质、肽或其他含胺分子高效偶联。

一、分子描述与化学特性

ATTO 680 NHS Ester 分子主要由三部分组成:

  1. ATTO 680 荧光团:提供远红荧光信号,穿透力强且对生物组织干扰小,适合高分辨成像和多通道实验。

  2. NHS 酯官能团:N-羟基琥珀酰亚胺活性酯可与蛋白质或多肽的初级胺形成稳定的酰胺键,实现共价偶联。

  3. 连接桥或间隔链:用于调整荧光团与标记分子的空间关系,减少对分子功能的干扰,同时改善溶解性。

化学上,NHS 活性酯易溶于极性有机溶剂(如DMF、DMSO),在水性体系中稳定性较低,应避免长时间水解。荧光团稳定性较强,但仍需避光保存以保持信号强度。

二、合成步骤概述

ATTO 680 NHS Ester 的合成一般分为三个主要阶段:染料前体制备、活性化和纯化表征。

  1. 染料前体制备
    合成始于 ATTO 680 核心染料的合成,通常采用苯基或吲哚基结构进行偶联,形成具有远红荧光特性的共轭体系。前体分子中需保留羧基(–COOH)作为后续活性化位点,同时保持荧光性质。该步骤通常在有机溶剂中进行,通过选择性反应和保护基策略控制分子结构。

  2. 活性化(NHS 酯化反应)
    将 ATTO 680 前体分子中的羧基与 N-羟基琥珀酰亚胺(NHS) 及偶联试剂(如 DCC 或 EDC)在干燥有机溶剂中反应,生成活性酯。反应中,羧基与 NHS 形成酰亚胺中间体,随后生成稳定的 NHS 酯,实现将荧光染料转化为可与初级胺反应的活性形式。此步骤需控制温度(一般室温至略低温)并避光操作,以防荧光团降解或NHS酯水解。

  3. 纯化与表征
    合成后的 ATTO 680 NHS Ester 通常通过高效液相色谱(HPLC)进行纯化,去除未反应的前体、偶联试剂及副产物。纯化后,通过质谱(MS)、核磁共振(NMR)以及紫外-可见和荧光光谱对结构、纯度及光学特性进行验证,确保产物适用于生物标记实验。纯化后的产物在干燥、避光条件下低温储存,可保持长时间活性。

瑞禧生物供应磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、磁性纳米颗粒、纳米金、近红外荧光染料、荧光量子点、碳纳米管、石墨烯及多种功能高分子材料。如有需求可咨询
产品名称:ATTO 680 NHS Ester,ATTO 680 活性酯
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研

厂家:瑞禧生物


产品目录

ICG-PDDA 吲哚菁绿标记邻苯二甲酸二乙二醇二丙烯酸酯
ICG-propofol 吲哚菁绿标记丙泊酚
ICG-protopanaxatriol 吲哚菁绿标记人参皂苷
ICG-PTX 吲哚菁绿紫杉醇

仅用于科研,不能用于人体。小编axc
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