AF594 Picolyl Azide 是一种基于 Alexa Fluor 594（AF594）荧光染料的功能化衍生物，其末端修饰了 吡啶基叠氮（Picolyl Azide）官能团。该分子结合了 AF594 荧光团的高亮度远红荧光信号和叠氮官能团的化学反应活性，使其可在生物正交化学中实现特异性标记，尤其适用于铜催化的叠氮-炔环加成（CuAAC）“点击”反应。AF594 激发波长约为590 nm，发射波长约为617 nm，在细胞成像、多通道荧光实验及分子示踪研究中表现优异。

一、分子描述与化学特性

AF594 Picolyl Azide 主要由三部分组成：

1. AF594 荧光核心：提供远红荧光信号，量子产率高，光稳定性良好，适用于荧光显微镜、流式细胞术及多通道成像。

2. Picolyl Azide 官能团：叠氮基团通过吡啶环修饰，提高与炔烃的点击反应效率，同时降低铜催化剂的需求，适合温和条件下的蛋白质或核酸标记。

3. 连接桥或间隔链：用于调整荧光团与叠氮官能团的空间位置，减少对标记分子功能的干扰，并改善水溶性和反应可及性。

化学上，AF594 Picolyl Azide 在干燥有机溶剂中稳定，可在缓冲液中短时间反应，但叠氮基团对强还原剂敏感，应避免极端pH和高温环境。其荧光团在光照下具有良好稳定性，但长期储存仍需避光低温保存。

二、合成过程概述

AF594 Picolyl Azide 的合成通常分为三个主要步骤：荧光核心前体制备、叠氮官能化和纯化表征。

1. 荧光核心前体制备
   首先合成 AF594 荧光核心，通常通过偶联芳香基或杂环基团形成共轭体系，以获得远红荧光性能。前体分子中保留羧基、胺基或其他可官能化位点，为后续叠氮官能化提供连接点。合成过程中需控制电子性质及空间结构，保证荧光团性能不受影响。

2. Picolyl Azide 官能化
   前体通过化学方法引入 Picolyl Azide 官能团。一般方法为先将前体与含吡啶基叠氮的碳链衍生物（如 Picolyl Azide 乙酸衍生物）通过酰化或酯化反应偶联，然后形成稳定的共价键。反应条件通常选择中性或微碱性缓冲体系，温度控制在室温或略低温度，避免叠氮基团降解，同时保证荧光团稳定。

3. 纯化与表征
   合成后的 AF594 Picolyl Azide 通常通过高效液相色谱（HPLC）进行纯化，去除未反应前体、副产物及偶联试剂。纯化后，通过质谱（MS）、核磁共振（NMR）、紫外-可见光谱及荧光光谱进行结构和光学性能验证。纯化后的产物可在低温避光条件下干燥储存，保证活性官能团及荧光性能长期稳定。

三、应用及优势

AF594 Picolyl Azide 的核心应用在于 铜催化叠氮-炔环加成（CuAAC）“点击”反应，可与含炔基的蛋白质、多肽或核酸分子高效偶联。其优势包括：

• 高选择性：叠氮基团专一与炔烃反应，减少生物体系中非特异性偶联。

• 低铜依赖：吡啶修饰叠氮可增强反应速率，降低铜催化剂浓度，保护生物分子活性。

• 温和条件：反应在室温、中性或弱碱性缓冲液中进行，无需强酸碱或高温。

• 远红荧光信号：低背景、光稳定性好，适合多通道成像。

常用于蛋白质标记、抗体偶联、核酸修饰、多分子示踪及活体成像研究。

厂家：瑞禧生物

产品目录

ICG-Streptavidin 吲哚菁绿标记链霉亲和素
ICG-sucrose 吲哚菁绿标记蔗糖
ICG-TPP 吲哚菁绿标记磷酸三苯酯
ICG-Transferrins 吲哚菁绿标记转铁蛋白