AT 590 Succinimidyl Ester 是以 ATTO 590 荧光染料为基础的功能化衍生物，末端通过 N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）活性酯 修饰，能够高效与蛋白质、多肽或其他含初级胺的生物分子共价偶联。AT 590 属于橙红荧光染料，激发波长约为592 nm，发射波长约为617 nm，具有高量子产率、良好光稳定性和适宜的水溶性，在细胞成像、多通道荧光实验和分子示踪研究中广泛应用。NHS 酯官能化赋予 AT 590 在温和条件下快速、特异性偶联的能力。

一、化学特性概述

1. 荧光核心
   AT 590 荧光团为共轭芳香体系结构，具有连续 π 电子体系，提供稳定的橙红荧光信号。共轭体系结构决定了其光学特性，包括高量子产率、光稳定性及可在多通道成像中使用的兼容性。

2. NHS 酯官能化
   NHS 酯能够特异性与生物分子中的初级胺（–NH₂）形成酰胺键。该反应温和、不可逆且高效，使 AT 590 Succinimidyl Ester 可用于蛋白质、多肽及抗体的荧光标记。

3. 水溶性及稳定性
   AT 590 Succinimidyl Ester 虽为水溶性改性衍生物，但在干燥有机溶剂中更稳定，可长期储存。其化学结构在缓冲体系中稳定，能够避免非特异性降解和荧光损失。

二、溶解度特性

AT 590 Succinimidyl Ester 的溶解度受化学结构、溶剂性质及温度影响，其主要特性如下：

1. 有机溶剂溶解性

   • 在干燥的极性有机溶剂中，如 二甲基亚砜（DMSO）、二甲基甲酰胺（DMF） 和乙腈，AT 590 Succinimidyl Ester 溶解性良好。

   • 有机溶剂可有效溶解染料，使其在偶联反应前保持高浓度和稳定性，同时避免水分解 NHS 酯。

   • 为保证溶解度，通常建议溶解浓度在 1–10 mM 范围，避免过高浓度引起聚集或沉淀。

2. 水相体系溶解性

   • AT 590 NHS 酯在纯水中溶解度有限，通常需在 pH 7–8 的缓冲液中短时间操作。

   • 为防止水解，可先在有机溶剂（如 DMSO）中溶解，再加入缓冲液进行反应。

   • 在水相体系中反应时间需控制在数分钟至数小时，避免 NHS 酯水解降低偶联效率。

3. 温度影响

   • 室温下，AT 590 Succinimidyl Ester 在有机溶剂中稳定，可操作数小时至一天。

   • 高温或长时间暴露于水相体系中会加速 NHS 酯水解，降低反应活性。

   • 因此，在储存和使用过程中通常低温避光保存（–20°C 或 4°C），以保持稳定性。

4. 缓冲液选择

   • 为避免 NHS 酯水解或非特异性反应，偶联反应常选用 碳酸盐缓冲液（pH 8.0–8.5） 或 磷酸盐缓冲液（pH 7.0–7.5）。

   • 含胺类或硫醇的缓冲液可能引起非特异性偶联，需要事先排除或控制。

三、操作建议

• 建议在操作前将 AT 590 NHS Ester 溶解于干燥 DMSO 中，制备工作液以避免水解。

• 偶联至蛋白质或多肽时，应在低温和缓冲体系中进行，控制反应时间和 pH，以保证标记效率和荧光稳定性。

• 反应完成后，可通过透析、色谱或滤过去除未反应染料，保证标记物纯度。

厂家：瑞禧生物

产品目录

IR1048-TCO
IR-1048-TCO
IR-1061-Alkyne
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IR-1061-Cl