AF 546 NHS Ester 是基于 Alexa Fluor 546（AF546） 荧光染料的功能化衍生物，其末端通过 N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）活性酯 修饰，可与蛋白质、多肽或其他含初级胺的生物分子进行共价偶联。AF546 属于红橙色荧光染料，激发波长约为556 nm，发射波长约为573 nm，具有高量子产率、光稳定性好、水溶性佳的特点，使其在多通道荧光成像、免疫标记和生物分子示踪中具有广泛应用。

一、化学特性与标记原理

1. 荧光核心
   AF546 荧光团具有稳定的共轭芳香结构，提供明亮、稳定的红橙色荧光信号。其分子设计保证在长时间光照下依然保持较高的荧光强度，适合高分辨率显微成像和流式细胞分析。

2. NHS 酯官能化
   NHS 酯能够与生物分子中的初级胺（–NH₂）反应形成酰胺键。该反应温和、特异性高且不可逆，保证荧光团牢固标记在目标生物分子上。偶联过程中，pH 通常控制在 7–8，避免蛋白质变性，同时保证 NHS 酯活性。

3. 水溶性与稳定性
   AF546 SE 保持染料水溶性，便于在生物缓冲液、细胞培养基或体液中操作。干燥保存条件下，活性酯稳定，可长期储存。水相偶联操作时，应尽量减少水分解，保证标记效率。

二、生物应用

AF546 NHS Ester 主要应用于 蛋白质、抗体、多肽及核酸标记，在细胞生物学、分子生物学及成像研究中发挥重要作用。其生物应用可概括如下：

1. 免疫荧光标记
   AF546 SE 可用于抗体偶联，实现对特定蛋白质或抗原的可视化。标记后的抗体在荧光显微镜或共聚焦显微镜下提供高亮度红橙色信号，便于观察细胞结构、蛋白定位及亚细胞分布。

2. 多通道成像
   AF546 发射光谱在红橙区，与蓝色、绿色荧光染料（如 DAPI、FITC）可无干扰叠加，实现多通道同时成像。通过多种荧光标记结合，可研究蛋白相互作用、共定位及细胞功能动态。

3. 流式细胞分析（FACS）
   将 AF546 SE 偶联于抗体或多肽，可用于细胞表面或细胞内标记，结合流式细胞仪分析细胞表型、分子表达水平及群体异质性。其高亮度和光稳定性保证数据可靠性。

4. 蛋白质与多肽示踪
   NHS 酯官能化使 AF546 可直接与蛋白质、酶或多肽偶联，进行体外或体内示踪实验。标记后的生物分子保持活性，同时提供可追踪的荧光信号，用于研究分子动力学、蛋白运输及药物递送。

5. 纳米颗粒与载体修饰
   AF546 SE 可用于功能化纳米颗粒、脂质体或聚合物载体表面，实现荧光追踪和药物载体分布研究，为纳米药物递送和靶向输送研究提供工具。

厂家：瑞禧生物

产品目录

IR-1061-COOH
IR1061-DBCO
IR-1061-DBCO
IR1061-Maleimide
IR-1061-Maleimide