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Annexin V Fluorescein,异硫氰酸荧光素标记膜联蛋白V的核心应用场景

时间:2025-11-25 16:22:15       浏览:67
产品名称:Annexin V Fluorescein,异硫氰酸荧光素标记膜联蛋白V的核心应用场景
1. 结构特性与化学设计
核心结构:
Annexin V蛋白:钙依赖性磷脂结合蛋白,分子量35-36 kDa,由319个氨基酸组成,含4个保守重复单元形成α-螺旋盘状结构,含钙离子结合位点。关键位点(如Trp185、Lys286/290)影响钙结合与膜相互作用,过度标记(如>2个荧光基团)可能丧失活性。
荧光素(FITC)标记:通过异硫氰酸酯基团(-N=C=S)与蛋白氨基共价偶联,形成稳定硫脲键,激发波长494 nm,发射波长516-518 nm(绿色荧光),量子产率高,光稳定性良好。
功能机制:生理钙浓度下特异性结合外翻PS(凋亡早期标志),健康细胞PS位于膜内侧,凋亡启动时外翻至膜外侧,成为荧光标记靶点。
2. 核心应用场景
细胞凋亡检测:
早期凋亡识别:与PI/7-AAD联用区分细胞状态——早期凋亡(Annexin V+/PI-)、晚期凋亡/坏死(Annexin V+/PI+)、正常细胞(双阴性)。
多参数分析:FITC绿色荧光与PI红色荧光兼容,支持流式细胞仪/荧光显微镜多通道检测,结合Hoechst等核染料可同步观察膜与核变化。
扩展应用:生物膜研究(如脂质体磷脂不对称性)、环境应激响应(氧化/温度/化学刺激下膜动态)、植物细胞程序性死亡、药物筛选(凋亡诱导剂效果评估)。
3. 合成路径与储存条件
合成逻辑:
偶联反应:FITC的异硫氰酸酯基团与Annexin V的氨基在弱碱性条件(pH 8.0-9.0)下反应,形成稳定硫脲键。需控制反应条件(如摩尔比、温度、时间)避免过度标记导致活性丧失。
纯化与储存:柱层析或HPLC纯化,产品为固体/粉末,-20℃避光干燥保存,溶解后分装避免反复冻融;运输需低温干燥,避免光解或降解。


关于我们:
西安瑞禧生物科技有限公司经营的产品种类包括有:近红外荧光染料、点击化学产品、合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯,二氧化硅及介孔二影产品,荧光蛋白及荧光探针等,欢迎咨询。


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