Difluorocarboxyfluorescein NHS Ester, 6-isomer（CAS 2702251-82-7）的中文名称通常表述为 二氟羧基荧光素 N-羟基琥珀酰亚胺酯（6-异构体）。该分子由二氟羧基荧光素（Difluorocarboxyfluorescein, DCF）核心结构与 NHS（N-hydroxysuccinimide，N-羟基琥珀酰亚胺）活化羧酸官能团共价连接而成，兼具荧光特性和化学活性，是实验室中用于生物分子标记、化学偶联及功能化材料构建的重要工具。6-位异构体表示羧基位于荧光素苯环的第6位，保证了分子在反应和光学性能上的一致性与可控性。

从分子结构上看，该化合物主要由三部分组成：荧光素骨架、羧基官能团以及 NHS 酯活化端。荧光素骨架是由二氟取代的苯并异吲哚环和羟基苯环构成的共轭体系，具有扩展 π-共轭结构，使其在可见光区表现出高量子产率和稳定的荧光信号。6-位羧基通过化学修饰暴露于分子外侧，为 NHS 酯化提供反应位点。NHS 酯活化端通过将羧基转化为 N-羟基琥珀酰亚胺酯，提高羧基的亲核反应性，使其能够与含氨基的分子高效形成稳定酰胺键，实现分子偶联。

在结构合成方面，通常以二氟羧基荧光素 6-羧基异构体为起始原料，通过羧基活化反应制备 NHS 酯。反应机理依赖于羧酸与 NHS 及偶联剂（如 DCC、EDC）反应生成活化中间体。具体步骤为：首先在干燥有机溶剂中（如二氯甲烷、DMF）将 6-羧基 DCF 与 NHS 和偶联剂混合，羧酸羰基碳原子电子密度偏正，受偶联剂活化后形成 O-活化酯中间体；随后，NHS 分子上的羟基孤对电子攻击活化羰基，取代偶联剂离去基，生成稳定的 NHS 酯产物。整个反应通常在室温至略高温条件下进行，以避免荧光团降解或副反应发生。反应完成后，通过柱色谱、透析或晶体重结晶方法去除未反应起始物、偶联剂副产物和游离 NHS，获得纯净的 Difluorocarboxyfluorescein NHS Ester, 6-isomer。

该分子的结构设计兼顾了光学性能和化学反应性。二氟取代增强了荧光信号的稳定性和光耐受性，同时略微改变电子云分布，影响荧光激发和发射波长，使其适合于多色标记和共聚焦成像应用。NHS 酯端的化学活性确保其能够与蛋白质、肽链或其他含氨基分子高效偶联，形成稳定的酰胺键，不易水解或解离。6-位羧基位置的选择性保证了偶联反应的可控性，减少对荧光性能的影响，同时为定向偶联提供可靠位点。

在应用中，Difluorocarboxyfluorescein NHS Ester, 6-isomer 常用于生物分子标记，如蛋白质、抗体、多肽及小分子探针。其高荧光量子产率和远红外光区发射特性，使其在荧光成像、活细胞追踪和多通道检测中具有优势。通过 NHS 酯端的化学反应，可以在温和条件下实现高选择性标记，同时保持分子结构稳定和荧光性能完整，为研究生物体系动态提供可靠工具。

厂家：瑞禧生物

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花菁染料CY3标记双酸 CY3-diacid
花菁染料CY3标记双羧酸 CY3-bisCOOH
花菁染料CY3标记顺铂 CY3-CDDP
花菁染料CY3标记丝状蛋白 CY3-Filamin
花菁染料CY3标记四氮杂卓 CY3-tetrazine