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CFDA-SE,5(6)-羧基二乙酸荧光素琥珀酰亚胺酯的合成步骤概述

时间:2025-11-27 17:38:48       浏览:85
CFDA-SE,5(6)-羧基二乙酸荧光素琥珀酰亚胺酯的合成步骤概述

CFDA-SE的中文名称可表述为“5(6)-羧基二乙酸荧光素琥珀酰亚胺酯”,是一种常用的荧光活性化合物,具有多功能化学性质,广泛应用于细胞标记、蛋白质偶联及分子探针研究。其分子结构由荧光素核心、羧基二乙酸侧链和末端N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活性酯组成。荧光素核心提供可见光区强荧光发射,羧基二乙酸侧链赋予分子水溶性和金属离子配位能力,NHS活性酯则提供与氨基官能团共价偶联的能力,使CFDA-SE成为兼具光学信号和化学反应活性的多功能化合物。

在合成步骤上,CFDA-SE的制备通常可分为三个阶段。第一步是荧光素羧基活化,通过将荧光素分子与二乙酸衍生物进行保护性修饰,生成羧基二乙酸荧光素中间体。这一步骤通常在有机溶剂中进行,并通过酸碱调控实现选择性保护,保证羧基在后续反应中不被非特异性反应消耗。

第二步是羟基琥珀酰亚胺化反应,即将荧光素二乙酸中间体与NHS或其衍生物反应生成末端活性酯。该反应通常使用碳二亚胺类活化剂(如EDC)作为偶联介质,促进羧基与NHS形成稳定酯键。反应条件温和,控制pH值在中性至微碱性范围内,可有效提高产物收率并减少副产物生成。生成的CFDA-SE产物即具有末端活性NHS酯,可在后续生物标记或材料功能化中与氨基官能团反应形成稳定酰胺键。

第三步是产物的纯化与分离。由于合成过程中可能存在未反应的原料、保护基副产物及少量水解产物,通常采用柱层析或高效液相色谱(HPLC)进行分离。纯化过程中需在避光、低温条件下操作,以防荧光素光降解或活性酯水解。纯化后,产物通过核磁共振(¹H NMR)、红外光谱(FT-IR)、质谱(MS)及紫外-可见光光谱(UV-Vis)进行结构确认和光学性能验证。

CFDA-SE的多功能优势在于其化学结构设计。NHS活性酯提供高效、选择性的偶联能力,可与蛋白质、肽链、核酸或聚合物表面氨基形成稳定共价键;羧基二乙酸侧链增加水溶性并可参与金属离子配位反应,为荧光探针设计或复合材料功能化提供可能;荧光素核心提供强光学信号,可用于细胞成像、流式细胞术或生物传感器构建。结合这些特性,CFDA-SE可在活细胞标记、分子探针构建及多功能载体研究中实现高效可控应用。

总体而言,5(6)-羧基二乙酸荧光素琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)是一种多功能荧光衍生物,其分子设计结合了荧光信号、化学活性和水溶性,通过羧基保护-NHS活化-纯化表征的步骤制备得到。该化合物在化学研究和生物标记实验中能够实现高效偶联、稳定发光和可控功能化,为细胞追踪、蛋白质标记及复合材料研究提供可靠工具和灵活策略。

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产品名称:CFDA-SE
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研

厂家:瑞禧生物


产品目录

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花菁染料CY5.5标记透明质酸,5K, CY5.5-HA,5K
花菁染料CY5.5标记透明质酸钠 CY5.5-Hyaluronate
花菁染料CY5.5标记胃粘膜素,猪, CY5.5-MUCIN
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仅用于科研,不能用于人体。小编axc
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