花青素-水溶性活性酯，尤其是 Cy5.5-NHS 和 Sulfo-Cy5.5-NHS，常用中文名称为 Cy5.5-NHS 酯花青素染料 或 水溶性 Cy5.5-NHS 活性酯。该类染料属于花青素系列近红外光学分子，结构中带有 NHS（N-羟基琥珀酰亚胺）活性酯，部分衍生物带磺酸基（Sulfo），从而提高水溶性。NHS 酯端为亲电活性位点，可与含有伯胺（–NH₂）或类似亲核官能团的分子发生高效共价连接，使染料能够定向标记蛋白质、肽、多肽、核酸修饰体或其他氨基官能化分子，同时保留 Cy5.5 的近红外吸收与发射特性。磺酸化 Sulfo-Cy5.5-NHS 的引入显著增强了在水相环境中的分散性和稳定性，降低了聚集趋势，使其在水相体系中的反应更均匀，可用于复杂生物样品或界面体系的标记。

从反应机理上看，NHS 酯是一类典型的亲电活性官能团。其核心机理为 酰化反应：NHS 酯中的羰基碳对亲核试剂（如氨基）具有高度亲电性，当与氨基接近时，氨基的孤对电子进攻羰基碳，形成四面体过渡态；随后，NHS 羟基被置换，生成稳定的酰胺键，同时释放 N-羟基琥珀酰亚胺作为离去基。该反应特征为高效、选择性好，可在温和条件下进行，因此广泛用于生物分子标记。磺酸化结构对 NHS 酯的酰化活性影响较小，但增强了水溶性，使染料在水性缓冲体系中充分溶解并均匀分布，从而提高反应效率和标记均一性。

在实际操作中，水溶性 Cy5.5-NHS 或 Sulfo-Cy5.5-NHS 通常在中性或弱碱性缓冲液（如 pH 7.0–8.5）中与含氨基的目标分子反应。适宜的 pH 保证了氨基的亲核性，同时避免共轭染料体系的降解。反应温度通常控制在室温或略高，以维持染料结构稳定。溶液中可能添加少量有机助溶剂，如 DMSO，以提高疏水性目标分子的溶解性，同时水溶性 Sulfo-Cy5.5-NHS 可在大部分水相体系中直接溶解，无需助溶剂。

NHS 酯反应的另一个重要特点是 方向性和可控性。由于亲核攻击主要发生在自由氨基上，反应能够实现定向标记，从而在蛋白质或多肽上生成特定位点的酰胺键。通过调节染料与目标分子的摩尔比、反应时间以及温度，可以控制标记程度和染料密度。完成反应后，通常通过透析、凝胶过滤或柱层析去除未反应的染料，获得纯化后的标记物，用于进一步实验。

Sulfo-Cy5.5-NHS 的磺酸基不仅提高了水溶性，还可降低非特异结合，使其在复杂体系中具有较好的选择性和分布均匀性。该染料广泛应用于蛋白质标记、抗体修饰、肽和核酸探针的构建、细胞或材料表面固定以及界面分析中。其反应机理基于 NHS 酯的典型亲核酰化机制，结合磺酸化改善水相适应性的策略，使其成为研究和材料构建中可控、稳定的近红外光学标记工具。

厂家：瑞禧生物

产品目录

花菁染料Cy3标记10-羟基喜树碱 Cy3-10-Hydroxycamptothecin
花菁染料CY3标记6-叠氮 CY3-6-N3
花菁染料CY3标记Arg-9 CY3-Arg-9
花菁染料Cy3标记-C-反应蛋白 CY3-C-反应蛋白