BG-Alexa Fluor 647，中文名称通常表述为 苄基鸟嘌呤-Alexa Fluor 647，是一种将苄基鸟嘌呤（BG, Benzylguanine）与近红外荧光染料 Alexa Fluor 647 共价连接形成的功能性荧光探针。该分子兼具 BG 的特异识别能力和 Alexa Fluor 647 的高亮度、光稳定性及长波段发射特性，可用于 SNAP-tag 蛋白标记、细胞成像和分子示踪实验。Alexa Fluor 647 具有较长发射波长（约 665 nm），可在复杂生物体系中减少自发荧光干扰，实现高信噪比的可视化检测。BG 部分则作为特异性结合位点，使染料能够选择性与 SNAP-tag 蛋白反应形成稳定的共价结合，实现定向标记。

合成过程概述如下：

1. Alexa Fluor 647 活性酯的制备
   合成 BG-Alexa Fluor 647 的第一步通常是将 Alexa Fluor 647 染料转化为活性化衍生物，如 NHS 酯（N-hydroxysuccinimide ester）。通过将 Alexa Fluor 647 的羧基端与 NHS 以及适量碳二亚胺（如 DCC 或 EDC）反应生成 NHS 酯，可以在温和条件下激活羧基，使其具备高效亲电活性。此步骤需在无水或低水环境中进行，避免 NHS 酯水解，同时可使用有机溶剂如 DMSO 或 DMF 提高溶解性。

2. 苄基鸟嘌呤（BG）前体制备
   BG 前体通常保留一个可与活性酯反应的氨基官能团。苄基鸟嘌呤可通过标准有机合成方法获得，并在苄基末端引入氨基保护或自由氨基以用于后续偶联。保证氨基的活性和选择性是成功偶联的关键。

3. Alexa Fluor 647 与 BG 的偶联
   将 NHS 酯活化的 Alexa Fluor 647 与 BG 前体中的氨基进行共价连接，形成酰胺键，实现 BG-Alexa Fluor 647 的构建。该反应通常在缓冲或有机溶剂混合体系中进行，pH 控制在 7.0–8.5 范围，以保证氨基亲核性并保护染料共轭体系。反应温度一般控制在室温至 37 摄氏度，避光操作以减少染料光漂白。偶联反应时间可从数小时到过夜，确保完全反应。

4. 纯化
   偶联反应完成后，通常通过高效液相色谱（HPLC）进行纯化。HPLC 可采用反相色谱（C18）或混合相色谱系统，通过梯度洗脱分离未反应染料、未偶联 BG 前体及副产物。HPLC 检测可结合紫外吸收和荧光检测器，利用 Alexa Fluor 647 的特征吸收（约 650 nm）和发射（约 665 nm）波段精确收集目标产物。纯化后产物可冻干或低温储存以保持稳定性。

5. 表征
   纯化后的 BG-Alexa Fluor 647 可通过质谱（MS）确认分子量是否与预期一致，核磁共振（NMR）分析偶联结构和关键化学键。UV-Vis 和荧光光谱可用于验证染料光学特性是否保持完整，确保其在标记实验中具备高亮度和光稳定性。磺酸化或其他水溶性修饰有助于提高其在水相体系中的溶解性和分散性。

厂家：瑞禧生物

产品目录

花菁染料Cy3标记黄曲霉毒素B1 Cy3-AFB1
花菁染料CY3标记肌动蛋白 CY3-Actin
花菁染料CY3标记甲氨蝶呤 ?CY3-MTX
花菁染料CY3标记甲基四氮杂卓 Cy3-Methyltetrazine 1676067-48-3