TAMRA Succinimidyl Ester，中文名称可表述为 TAMRA N-羟基琥珀酰亚胺酯，是一种基于四甲基罗丹明（TAMRA）荧光染料的活性衍生物。TAMRA 染料具有明亮的红色荧光（吸收峰约 555 nm，发射峰约 580 nm）、良好的光稳定性和狭窄的吸收发射谱带，用于蛋白质标记、核酸标记及多重荧光检测实验。TAMRA Succinimidyl Ester 通过活化羧基形成 NHS 酯，使其能够与生物大分子中的伯氨基（通常为蛋白质赖氨酸侧链或 N 端氨基）共价结合，形成稳定的酰胺键，从而实现荧光偶联。

反应机理可概括为以下几个方面：

1. 活化羧基形成 NHS 酯
   TAMRA 分子末端的羧基通过 N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）活化，生成 TAMRA Succinimidyl Ester。这一步骤将羧基转化为高亲电性的 NHS 酯，使其能够在温和条件下与亲核氨基发生反应。NHS 酯在水性缓冲体系中具有一定的稳定性，但容易被水解，因此反应通常在干燥或低水条件下进行，以保证偶联效率。

2. 亲核取代反应（酰胺化）
   NHS 酯与生物大分子中的初级氨基发生亲核取代反应，氨基对羧基碳进行攻击，形成过渡态并脱去 NHS 生成稳定的酰胺键。该反应具有高选择性，主要作用于自由伯氨基，如蛋白质的 N 端氨基或赖氨酸残基侧链氨基，从而实现分子定向标记。

3. 反应条件调控
   反应通常在 pH 7.0–8.5 的缓冲体系中进行，这一范围既保证了氨基的亲核性，又避免蛋白质或其他生物分子的变性。温度多控制在室温至 37 ℃，以平衡反应速率和生物分子稳定性。水含量需适中，过高水量会导致 NHS 酯水解，降低反应效率。反应时间一般为数十分钟至数小时，根据目标分子浓度和标记程度适当调整。

4. 反应选择性与效率
   TAMRA Succinimidyl Ester 对伯氨基的选择性较高，通常不会与羟基或巯基显著反应。PEG 或其他空间柔性链可调节染料与目标分子之间的距离，减少标记对蛋白功能的干扰。为了提高标记效率，TAMRA NHS 酯常以过量使用，确保充分偶联，同时通过透析、凝胶过滤或 HPLC 去除未反应的染料和副产物。

5. 副反应与稳定性
   NHS 酯在水存在下可水解生成原羧酸，水解产物不具活性，因此需要在反应过程中控制水分。TAMRA 核心结构在弱光条件下稳定，但过度光照可能引起光漂白。因此反应和储存过程中需避光操作。偶联后的 TAMRA 与蛋白质形成共价酰胺键，具有良好的化学和光学稳定性。

6. 生物应用的机理基础
   通过酰胺化反应，TAMRA Succinimidyl Ester 可以将红色荧光染料稳固地标记到蛋白质、抗体或多肽上，使其在荧光显微镜、流式细胞仪或其他检测体系中可视化追踪。其机理依托于 NHS 酯活化羧基的高亲电性以及蛋白氨基的亲核性，形成不可逆共价结合，实现高效、可控和特异性标记。

厂家：瑞禧生物

产品目录

花菁染料CY3标记替莫唑胺 CY5-Temozolomide
花菁染料CY3标记天花粉蛋白 Cy3-trichosanthin
花菁染料CY3标记透明质酸 CY3-HA
花菁染料CY3标记脱氧尿苷三磷酸 CY3-dUTP