BHQ-2 azide（Black Hole Quencher-2 叠氮，BHQ-2叠氮）是一种高效非发光荧光淬灭剂衍生物，广泛应用于FRET探针、荧光标记、核酸修饰及纳米载体功能化等研究中。BHQ-2核心为高度共轭芳香体系，能够宽谱吸收可见光荧光染料发射的光能而不发光，实现非辐射淬灭。末端叠氮（–N₃）官能团提供生物正交化学反应位点，可与环炔（cyclooctyne）或其他适合的反应伙伴进行铜自由点击反应（SPAAC），在温和条件下实现特异性共价偶联。

化学结构特点

BHQ-2 azide分子主要由三部分组成：

1. 淬灭核心
   BHQ-2芳香共轭体系提供宽波段吸收（约480–580 nm），能够兼容多种可见光荧光染料，实现高效淬灭。非发光特性保证在FRET或荧光探针体系中降低背景信号，提高检测灵敏度。

2. 柔性连接链
   淬灭核心通过柔性链与叠氮官能团连接，提供空间自由度，减少淬灭核心对目标分子构象或反应位点的干扰。柔性链的长度和结构经过优化，以确保点击反应的效率和化学稳定性。

3. 末端叠氮官能团
   叠氮基为亲电子反应位点，可与环炔、TCO或其他反应伙伴发生铜自由点击化学（SPAAC），生成稳定的共价连接。叠氮点击反应具有高选择性、快速且温和的特性，适合在生物环境下进行偶联，而不影响淬灭核心或敏感分子。

典型反应步骤

1. 溶解BHQ-2 azide
   将BHQ-2 azide溶解于适宜的有机溶剂中，如DMSO或DMF，以保证分子完全溶解，避免团聚。溶液可在室温下制备，同时保持干燥条件，避免叠氮基水解或降解。

2. 准备反应伙伴
   对应反应分子需引入环炔、TCO或其他适合的叠氮点击化学活性官能团。若为蛋白质或多肽标记，需先通过巯基或氨基进行前期修饰，引入可点击反应的环炔或TCO基团。

3. 偶联反应
   将BHQ-2 azide溶液与含环炔或TCO官能团的分子混合，通常在室温下进行反应，无需催化剂。反应时间根据分子结构和浓度不同，可从几分钟至数小时不等。温和条件保护敏感分子，同时保证BHQ-2核心和叠氮基稳定。

4. 反应监控
   偶联过程可通过高效液相色谱（HPLC）、质谱（MS）或紫外-可见光谱（UV-Vis）进行监控。通过检测淬灭剂吸收峰或产物分子量变化，确认反应进程和偶联效率。

5. 纯化产物
   偶联完成后，通过HPLC纯化去除未反应的BHQ-2 azide、过量试剂及副产物。对于生物分子，可进一步通过透析、凝胶过滤或超滤去除小分子杂质，保证产物的化学纯度和生物兼容性。

6. 储存与使用
   纯化后的BHQ-2 azide偶联产物通常储存在干燥、避光条件下，避免光降解和叠氮基降解。在使用前，可根据需要溶解于缓冲液或适宜溶剂中，用于FRET探针、荧光监测或药物载体功能化。

厂家：瑞禧生物

产品目录

CY3.5-Cysteine CY3.5标记半胱氨酸
CY3.5-DA  Cy3.5标记多巴胺
CY3.5-D-Alanine CY3.5标记D-丙氨酸
CY3.5-Daunorubicin CY3.5柔红霉素