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CY3-lactoferrin,CY3标记乳铁蛋白的合成路线

时间:2025-12-05 10:25:10       浏览:57
CY3-lactoferrin,CY3标记乳铁蛋白的合成路线

CY3-lactoferrin 是将花菁染料 Cy3 共价标记在乳铁蛋白(Lactoferrin, LF)分子上的衍生物。乳铁蛋白是一种具有多功能生物活性的铁结合糖蛋白,广泛存在于血液、乳汁及其他分泌液中,具有良好的水溶性和多种结合位点。通过 Cy3 偶联,CY3-lactoferrin 获得可见光区荧光信号,同时保留乳铁蛋白的天然结构和结合活性,使其能够用于分子示踪、细胞摄取分析、受体识别及药物递送研究。Cy3 的共轭花菁骨架在约 550 nm 吸收并在 570–590 nm 发射,为实验提供高灵敏度和稳定的荧光信号。

CY3-lactoferrin 的合成路线主要基于乳铁蛋白上的氨基与 Cy3 活性酯的亲核偶联反应。乳铁蛋白分子中含有丰富的赖氨酸残基,其 ε-氨基是最常用的偶联位点。最常用的标记试剂为 Cy3-NHS 酯,通过羰基的亲核进攻形成稳定的酰胺键。合成过程中通常将乳铁蛋白溶解在弱碱性缓冲液中(pH 7.5–8.5),保持蛋白质构象稳定,同时加入少量有机溶剂(如 DMSO)以促进 Cy3 的溶解和反应。反应温和进行数小时至一夜,确保充分偶联。

在合成过程中,如乳铁蛋白上存在多种可反应位点,可使用保护基策略对非目标氨基进行暂时保护,以提高偶联的特异性和可控性。偶联完成后,体系中通常含有未反应的 Cy3、游离蛋白及副产物,需要进一步纯化。纯化方法一般采用透析、凝胶过滤或高效液相色谱(HPLC),通过分子量和极性差异去除杂质,获得高纯度 CY3-lactoferrin。纯化后产物可冻干或溶解于缓冲液保存,并在低温避光条件下保持稳定性和荧光性能。

标记产物的表征是合成路线的重要环节。紫外-可见光谱可验证 Cy3 的吸收峰和乳铁蛋白的蛋白质吸收峰;荧光光谱可确认标记分子发射信号和亮度;质谱(如 MALDI-TOF 或 ESI-MS)可分析偶联效率和分子量变化;圆二色谱(CD)可检测蛋白二级结构是否保持完整。这些表征方法确保 CY3-lactoferrin 分子在荧光标记的同时保留蛋白质活性和结构稳定性。

瑞禧生物供应磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、磁性纳米颗粒、纳米金、近红外荧光染料、荧光量子点、碳纳米管、石墨烯及多种功能高分子材料。如有需求可咨询
产品名称:CY3-lactoferrin,CY3标记乳铁蛋白
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研

厂家:瑞禧生物


产品目录

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仅用于科研,不能用于人体。小编axc
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