CY3.5‑tetrazine 是在四氮杂卓（tetrazine）母核上引入花菁染料 Cy3.5 所形成的荧光‑反应双功能分子。其核心结构由两个关键部分组成：第一部分为 1,2,4,5‑四氮杂苯型的 tetrazine 环，其特征是高度电子缺陷、芳香性强、反应活性高；第二部分为 Cy3.5 花菁染料结构，其为典型的对称性三亚甲基花菁染料，含有两个吲哚或苯并吲哚阳离子端基，通过一条扩展的共轭多亚甲基链连接。CY3.5‑tetrazine 将这两者以共价方式结合，使其既具备 tetrazine 的生物正交反应活性，又保留 Cy3.5 在 570–620 nm 区域的强荧光发射与高光稳定性。

在结构上，tetrazine 环是一个由四个氮原子和两个碳原子构成的六元芳香环，通常呈平面性结构。由于环内氮原子多而密集，使其具有明显的电子受体特征，因此四氮杂卓能高效捕获电子丰富的烯烃，尤其是顺式烯如反式环辛烯（TCO），从而参与快速的逆电子需求 Diels–Alder (IEDDA) 反应。这种反应是 CY3.5‑tetrazine 在生物化学研究中最核心的功能之一，也是其结构设计的基础。典型 tetrazine 的吸电子能力来源于环上多个氮原子的孤对电子 delocalization，使其比普通芳香杂环具有更低的 LUMO 能级，从而显著加快与富电子烯的反应速率。

CY3.5 借由两个带正电荷的吲哚类末端结构形成对称染料骨架，中间通过扩展的三亚甲基链实现长程 π‑共轭，这种大共轭体系赋予 Cy3.5 远红光区域的吸收与发射特征。与传统 Cy3 相比，Cy3.5 在亚甲基链上增加一个双键或额外的亚甲基，使其光谱红移，同时提高荧光量子产率。染料的两个端基常含磺酸基或季铵基，用以增加水溶性、提高在生物环境中的稳定性并减少非特异性结合。整个染料为正电性，与 tetrazine 的中性或弱电子受体结构形成鲜明的电子对比，使标记分子既能保持化学稳定，又能维持荧光性能。

在 CY3.5‑tetrazine 的整体构架中，两部分通过稳定、柔性的共价连接子（linker）相连，此连接子通常含胺键、醚键或酯键，具有一定的空间柔性，可避免 tetrazine 环与染料之间产生过强的电子耦合。过强耦合可能导致荧光猝灭，因此连接子的设计需要在化学稳定性与光学性能之间取得平衡。空间隔离使 Cy3.5 维持良好荧光发射，而 tetrazine 仍可进行高效 IEDDA 反应。部分结构中还会利用 PEG 链段减少疏水性染料与蛋白质或细胞膜的非特异性吸附。

厂家：瑞禧生物

产品目录

花青素5标记氮川三乙酸-镍 Cy5-NTA-NI
花青素5标记多肽药物MMI-0100 Cy5-MMI-0110
花青素5标记聚-聚，2-乙基-2-噁唑啉，-N-羟基琥珀酰亚胺 CY5-PEOz-N-Hydroxysuccinimide ester
花青素5标记聚-聚，2-乙基-2-噁唑啉，-生物素 CY5-PEOz-Biotin