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CY3-Laminin(Cy3 标记的层粘连蛋白)是将橙红色荧光染料 Cy3 共价连接到层粘连蛋白(Laminin)分子上形成的荧光标记蛋白。Laminin 是一种高分子量多亚基细胞外基质蛋白,主要由 α、β、γ 链组成,具有交联网络结构,可促进细胞黏附、迁移及分化。通过在 Laminin 分子上引入 Cy3 标记,形成的 CY3-Laminin 在保持蛋白结构和生物学活性的前提下获得光学示踪能力。Cy3 的吸收和发射波长位于可见光橙红区,信号稳定、强烈,可通过荧光显微镜、多通道成像或光谱分析系统观察 CY3-Laminin 在细胞外基质、载体材料或体外体系中的分布和定位。标记位置通常选择在蛋白表面非活性或不参与受体结合的残基,以减少对 Laminin 功能域的影响。
CY3-Laminin 的合成步骤概述通常包括蛋白准备、标记反应、反应终止及纯化表征四个主要环节。第一步,蛋白准备阶段需要获得纯化的 Laminin 蛋白溶液,溶解于适宜缓冲液中(如 PBS,pH 7.4),保持蛋白天然构象和活性。可通过透析或浓缩调整蛋白浓度,并确保体系中无对标记反应产生干扰的小分子杂质。
第二步为标记反应阶段。常用 Cy3 衍生物如 N-羧基琥珀酰亚胺酯(NHS-ester)或马来酰亚胺衍生物,通过与 Laminin 表面赖氨酸氨基或半胱氨酸巯基发生共价反应形成稳定键。反应在温和缓冲体系中进行,通常控制 pH 7.0–8.5、温度 4–25°C,以保持蛋白折叠和生物活性,同时保证标记效率。柔性连接臂的设计使 Cy3 荧光团在空间上具有自由度,减少对蛋白三维结构的干扰。
第三步是反应终止及杂质去除。反应完成后,可加入低分子量胺类或巯基化合物终止未反应的 Cy3 活性基团,防止非特异性交联。随后,通过凝胶过滤(size-exclusion chromatography)、透析或超滤方法去除游离 Cy3 分子和副产物,得到纯化的 CY3-Laminin。
第四步为纯化和表征。纯化后的 CY3-Laminin 可通过荧光光谱测定确认 Cy3 标记,SDS-PAGE 结合荧光扫描验证分子量和标记均一性。UV-Vis 吸收光谱可用于计算标记比例,动态光散射或透射电子显微镜可评估蛋白聚集状态。功能性验证包括细胞黏附实验或体外基质结合实验,以确认标记过程未显著影响 Laminin 的生物学活性。
瑞禧生物供应磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、磁性纳米颗粒、纳米金、近红外荧光染料、荧光量子点、碳纳米管、石墨烯及多种功能高分子材料。如有需求可咨询产品名称:CY3-Laminin
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
厂家:瑞禧生物

产品目录
CY5-聚乙二醇-UTP,Cyanine5-PEG-UTP,
CY5-聚乙二醇-α-糜蛋白酶,Cyanine5-PEG-α-Chymotrypsin,
CY5-聚乙二醇-白藜芦醇,Cyanine5-PEG-Resveratrol,
CY5-聚乙二醇-波形蛋白,Cyanine5-PEG-SPA,
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