Cy3-标记链霉亲和素（Cy3-Streptavidin） 是通过共价方式将 Cy3 荧光染料连接到链霉亲和素分子表面的复合物，使其在光学分析、分子追踪及功能化应用中具有可视化能力。链霉亲和素（Streptavidin, SA）为四聚体蛋白，每个四聚体可结合四个生物素分子，结构稳定，折叠完整，表面暴露的赖氨酸、半胱氨酸和羟赖氨酸等残基为 Cy3 的共价连接提供理想位点。Cy3-Streptavidin 融合了链霉亲和素的高亲和性和 Cy3 的光学信号特性，使其在荧光标记、免疫捕获、表面功能化及生物分子成像等实验中应用广泛。

Cy3 属于卡宾菁染料，其分子骨架由两端的吲哚啉或苯并吲哚环与中间的三亚甲基多烯链组成，形成延展的 π 共轭体系，吸收峰约为 540–550 nm，发射峰位于 560–570 nm。染料分子通常带有亲水性取代基，如磺酸基，提高在水溶体系中的分散性并降低荧光淬灭。标记 Cy3 的衍生物通常包括 NHS 酯、maleimide 和叠氮基，可与蛋白表面胺基、巯基或点击化学位点形成共价键。标记通常发生在蛋白表面暴露位点，避免干扰生物素结合位点，从而保持蛋白功能完整。

纯化方法通常基于分子量、疏水性及亲和性特征。标记反应完成后，混合体系中可能存在未反应的自由 Cy3、部分标记的蛋白或蛋白聚集体。常用的纯化方法包括凝胶过滤（Size-Exclusion Chromatography, SEC）、透析或离心过滤等。凝胶过滤可通过分子大小分离标记蛋白和游离染料，确保收集到的 Cy3-Streptavidin 为单体或四聚体形式，并去除未结合染料。透析和离心过滤则可去除小分子杂质，提高样品纯度。对于特定应用，也可结合亲和层析，如利用生物素修饰载体对 Streptavidin 进行选择性结合和洗脱，以获得功能性 Cy3-Streptavidin。

表征手段主要包括荧光光谱、紫外-可见吸收光谱、SDS-PAGE、电泳以及功能性检测。荧光光谱可验证 Cy3 的吸收和发射特性，确保荧光标记成功并评估标记效率；紫外-可见光谱可测定蛋白浓度及染料-蛋白摩尔比，辅助量化标记程度。SDS-PAGE 可评估标记后蛋白的完整性和聚集状态，通过荧光成像或银染结合分析，确认 Cy3-Streptavidin 为单体或四聚体形式。功能性检测可包括生物素结合实验，验证标记后的 Streptavidin 保持高亲和性和特异性。

在表征过程中，标记密度、荧光强度和蛋白功能保持之间需取得平衡。过高的标记密度可能影响蛋白折叠或生物素结合位点，而过低的标记密度可能导致荧光信号不足。通过优化反应比例、pH、温度和缓冲体系，可获得稳定、功能完整且具有良好荧光特性的 Cy3-Streptavidin。

厂家：瑞禧生物

产品目录

CY7标记褪黑素 CY7-Melatonin
CY7标记脱硫生物素 CY7-Desthiobiotin
CY7标记万古霉素 CY7-Vancomycin
CY7标记蜗牛酶 CY7-Snailase
CY7标记细胞色素C CY7-Cytochrome-C