Cy3-标记卵清蛋白（Cy3-OVA, Cy3-Conjugated Ovalbumin） 是将 Cy3 荧光染料通过共价方式连接到卵清蛋白（Ovalbumin, OVA）分子上形成的荧光标记复合物，用于免疫学研究、分子追踪、细胞摄取分析和荧光成像实验。卵清蛋白是一种广泛应用的模型蛋白，分子量约 45 kDa，含有丰富的赖氨酸侧链和氨基端，为 Cy3 的共价连接提供理想的反应位点。Cy3-OVA 结合了蛋白的生物活性与 Cy3 的光学可视化特性，可用于抗原递送研究、免疫检测以及蛋白动力学和分布分析。

Cy3（Cyanine 3） 属于卡宾菁类荧光染料，其分子骨架由两端的吲哚啉或苯并吲哚环通过中间三亚甲基多烯链相连，形成延展的 π 共轭体系，使其能吸收约 540–550 nm 的光并在 560–570 nm 发射红橙色荧光。染料分子通常带有亲水性磺酸基或其他取代基，增强在水溶体系中的分散性并减少聚集引起的荧光淬灭。为了实现卵清蛋白标记，Cy3 通常采用活性衍生物形式，如 NHS 酯、maleimide 或叠氮基，可选择性与蛋白表面的赖氨酸胺基或半胱氨酸巯基形成共价键。标记反应一般发生在蛋白表面暴露的侧链位点，尽量避免影响蛋白构象和活性。

合成过程概述包括以下步骤：首先，将卵清蛋白溶解在适宜缓冲液中（pH 7–9），确保蛋白折叠稳定，同时赖氨酸侧链处于未质子化状态，以利于亲核攻击。其次，将 Cy3-NHS 酯溶解在干燥极性有机溶剂（如 DMSO 或 DMF）中，缓慢加入蛋白溶液，使蛋白氨基与 Cy3-NHS 酯反应形成稳定的酰胺键。反应通常在温和、避光条件下进行，以保持 Cy3 荧光性质和蛋白构象。对于 maleimide 或点击化学衍生物，则通过与蛋白巯基或炔基反应形成硫醚键或三唑环，实现共价标记。反应时间、温度和染料与蛋白摩尔比需优化，以平衡标记效率与蛋白功能保持。

纯化步骤旨在去除未反应的自由 Cy3 和反应副产物，确保获得高纯度 Cy3-OVA。常用方法包括透析、凝胶过滤（Size-Exclusion Chromatography, SEC）和离心过滤。透析可通过半透膜去除小分子游离染料，凝胶过滤可根据分子大小分离标记蛋白和游离染料，保证蛋白的单体或折叠状态完整。对于特定实验需求，也可结合离子交换或亲和层析进一步纯化。

表征方法包括荧光光谱、紫外-可见吸收光谱、SDS-PAGE 和质谱分析。荧光光谱可验证 Cy3 吸收和发射峰，确认标记成功并评估荧光强度；紫外-可见光谱可测定蛋白浓度并计算染料-蛋白摩尔比；SDS-PAGE 可分析蛋白完整性和聚集状态；质谱则可精确确认标记位点和标记数量。通过这些表征手段，可以确保 Cy3-OVA 在荧光信号、蛋白稳定性和功能性之间取得平衡。

厂家：瑞禧生物

产品目录

CY7标记异麦芽六糖 CY7-Isomaltohexaose
CY7标记异麦芽三糖 CY7-Isomaltotriose
CY7标记异麦芽四糖 CY7-Isomaltotetraose
CY7标记异麦芽糖 CY7-Isomaltose
CY7标记异麦芽五糖 CY7-Isomaltopentaose