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磷酸吡哆醛PLP,CY5-磷酸吡哆醛,CY5-PLP的纯化与表征

时间:2025-12-22 09:45:38       浏览:67
磷酸吡哆醛PLP,CY5-磷酸吡哆醛,CY5-PLP的纯化与表征

磷酸吡哆醛(PLP)是维生素 B6 的活性辅酶形式,含有醛基和磷酸基团,可参与多种氨基酸代谢相关的生物化学反应。在化学标记与荧光探针设计中,PLP 可作为活性官能团与胺基或蛋白质残基形成可逆席夫碱结构,实现温和的分子偶联。CY5-磷酸吡哆醛(CY5-PLP)是将近红外氰碱类荧光染料 CY5 与 PLP 官能团共价连接的功能化分子。CY5 荧光核心提供稳定的近红外发射信号(约650–700 nm),PLP 单元提供可与生物胺基分子反应的化学活性,从而构建具有荧光可追踪特性和化学功能的标记工具。

从化学结构上看,CY5-PLP 由 CY5 荧光母核、柔性连接桥以及末端 PLP 功能团组成。柔性连接桥隔离荧光核心与 PLP 官能团,减少电子干扰并保持荧光性能。PLP 含有醛基,可与氨基形成席夫碱结构,同时磷酸基团提高分子水溶性和生物相容性,使 CY5-PLP 可在水相和生物缓冲体系中稳定分散并用于生物偶联实验。

纯化方法上,CY5-PLP 通常采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)或柱层析进行分离,以去除未反应的 CY5 衍生物、游离 PLP 及副产物。由于 CY5 核心具有强光吸收特性,可通过紫外-可见检测实现在线监控纯化进程。纯化条件通常选用水-有机溶剂梯度(如水/乙腈体系),并添加微量缓冲盐或酸以稳定荧光染料和 PLP 官能团。纯化后得到的 CY5-PLP 产品通常为深红色固体或高浓度母液,溶解性良好,适用于水相或缓冲体系。

表征方法包括光谱和结构分析。紫外-可见吸收光谱可确认 CY5 荧光核心的特征吸收峰;荧光光谱可验证近红外发射性能。^1H NMR 和 ^13C NMR 可用于确认 CY5-PLP 的核磁结构,尤其是连接桥及 PLP 官能团的存在。质谱(MS)分析可验证分子量及纯度,同时可用于确认 PLP 的偶联完整性。此外,可通过薄层色谱(TLC)或高效液相色谱(HPLC)对纯化效果进行二次验证,确保无未偶联杂质存在。

总体而言,CY5-PLP 通过将近红外荧光染料与 PLP 功能团结合,实现了荧光追踪与生物分子偶联功能的整合。通过反相色谱纯化和多种光谱及质谱表征,可确保产物纯度和结构完整性,为蛋白质标记、酶活性探针开发及生物分子研究提供可靠的化学工具和实验基础。

瑞禧生物供应磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、磁性纳米颗粒、纳米金、近红外荧光染料、荧光量子点、碳纳米管、石墨烯及多种功能高分子材料。如有需求可咨询
产品名称:磷酸吡哆醛PLP,CY5-磷酸吡哆醛
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研

厂家:瑞禧生物


产品目录

N-Desthiobiotin-N-bis(PEG4-t-butyl ester)
Sulfosuccinimidyl 6-(biotinamido)hexanoate
Biotin-PEG4-amino-t-Bu-DADPS-C6-azide
(+)-Biotinamidohexanoic acid hydrazide

仅用于科研,不能用于人体。小编axc
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