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AF568 Tyramide Conjugates,AF568-酪胺酯偶联物的制备方法

时间:2025-12-23 09:35:04       浏览:46
AF568 Tyramide Conjugates,AF568-酪胺酯偶联物的制备方法

AF568 Tyramide Conjugates 的中文名称通常为AF568-酪胺酯偶联物,也可称为酪胺基荧光素 AF568 偶联试剂。其中,“AF568”表示 Alexa Fluor 568 荧光染料,发射波长约为 603 nm,呈橙红色荧光;“Tyramide”表示酪胺衍生物,是一种芳香酚类化合物,在过氧化物酶催化下可生成活性自由基,与酪氨酸残基共价结合,实现信号放大和标记。该偶联物常用于免疫组化、荧光原位杂交及高灵敏度分子检测实验。

二、制备方法概述
AF568 Tyramide Conjugates 的制备主要包括荧光染料活化与酪胺偶联两部分,其步骤如下:

  1. 染料活化
    AF568 荧光染料通常以羧基形式存在。在偶联前,需要通过活化剂(如碳二亚胺类 EDC 或 NHS 酯化方法)将羧基转化为反应活性中间体,如 NHS 酯。这一步使荧光染料具备亲电性,便于与酪胺上的氨基形成稳定共价键。

  2. 酪胺偶联
    酪胺(Tyramide)分子含有苯环和酚羟基,可提供反应位点。在缓冲体系中,活化后的 AF568 与酪胺发生亲核偶联反应,形成稳定的酰胺键,将荧光染料共价连接到酪胺分子上。反应条件通常温和,以避免染料分解或酪胺结构破坏。

  3. 纯化处理
    偶联反应完成后,通过高效液相色谱(HPLC)、透析或凝胶过滤等方法去除未反应的染料、活化剂及副产物。纯化后的 AF568 Tyramide Conjugates 为水溶性荧光试剂,可直接用于生物实验。

  4. 储存与使用
    纯化后的偶联物通常冻干保存,避光低温(-20℃)可长期保持稳定。在实验中使用时可溶于缓冲液或去离子水,适用于过氧化物酶催化的信号放大体系。

三、应用特点
AF568 Tyramide Conjugates 可在酶催化条件下快速形成反应性自由基,与靶蛋白酪氨酸残基共价结合,实现荧光信号放大。其橙红色荧光稳定、背景低,适合多通道荧光检测、免疫标记和成像实验。

四、总结
AF568 Tyramide Conjugates 是通过荧光染料活化与酪胺偶联形成的功能性荧光标记物,结合了高灵敏度信号放大和稳定的荧光性能,广泛应用于免疫组化、荧光原位杂交及生物分子检测实验中。

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产品名称:AF568 Tyramide Conjugates,AF568-酪胺酯偶联物
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研

厂家:瑞禧生物


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