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BHQ-1 DMT 亚磷酰胺的中文名称通常为BHQ-1-DMT 磷酰胺化物,也可称为BHQ-1-DMT 磷酰胺试剂。其中,BHQ-1(Black Hole Quencher-1)是一种非发光淬灭剂,常用于荧光探针和分子检测体系中;DMT(Dimethoxytrityl)为 5′-羟基保护基,用于固相合成中保护核酸羟基;“亚磷酰胺(Phosphoramidite)”表示其为固相核酸合成中常用的活性中间体,可与核酸链上的羟基发生偶联反应,将淬灭基团引入寡核苷酸分子。
二、反应步骤
羟基保护
在固相核酸合成中,5′-羟基通常被 DMT 基团保护,以避免在合成循环中发生非特异性反应。BHQ-1 DMT 亚磷酰胺在合成前已经包含 DMT 保护基,以保证磷酰胺化偶联步骤的选择性。磷酰胺化偶联
BHQ-1 DMT 亚磷酰胺具有磷(III)中心,在活化剂(如四唑类)存在下可与固相载体上去保护的羟基发生亲核偶联,形成中间的磷酰胺键。偶联过程通常在无水有机溶剂(如乙腈)中进行,以保证反应效率和磷酰胺稳定性。氧化步骤
偶联完成后,将磷酰胺键氧化为稳定的磷酸酯键,形成牢固的共价连接,使 BHQ-1 稳定结合在寡核苷酸链的末端。这一步可使用氧化试剂(如碘水溶液)在温和条件下完成,保证核酸链和 BHQ-1 基团结构完整。去保护与清洗
完成偶联和氧化后,DMT 保护基可根据需要去除,暴露 5′-羟基,便于后续延伸或标记。随后通过适当的溶剂冲洗,去除未反应的磷酰胺试剂和副产物,为下一步合成或分析提供纯净的寡核苷酸。纯化与储存
偶联后的 BHQ-1 修饰寡核苷酸通常通过高效液相色谱(HPLC)或柱层析进行纯化,去除残余试剂和副产物。纯化产物可冻干储存于低温避光条件下,以保持淬灭剂活性和化学稳定性。
三、总结
BHQ-1 DMT 亚磷酰胺通过磷酰胺化偶联机制,将非发光淬灭基团引入寡核苷酸链末端。其反应步骤包括羟基保护、磷酰胺偶联、氧化、去保护及纯化,整个过程温和、高效且可控。该试剂广泛应用于荧光-淬灭探针制备、分子检测及核酸功能化研究,为分子生物学和生物化学实验提供可靠的化学工具。
产品名称:BHQ-1 DMT 亚磷酰胺
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
厂家:瑞禧生物

产品目录
RhodamineB-PEG-Transferrin
RB-聚乙二醇-溶菌酶
RhodamineB-PEG-Lysozyme
RB-聚乙二醇-过氧化氢酶
RhodamineB-PEG-Catalase
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