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AF594-α-Bungarotoxin,AF594 荧光标记 α-眼镜蛇毒素的反应步骤

时间:2025-12-24 10:00:25       浏览:46
AF594-α-Bungarotoxin,AF594 荧光标记 α-眼镜蛇毒素的反应步骤

一、中文名称
AF594-α-Bungarotoxin 的中文名称通常表述为AF594 荧光标记 α-眼镜蛇毒素,也可称为荧光素 AF594 修饰 α-蛇毒素。其中,AF594 表示羧基活化的荧光染料 Alexa Fluor 594,具有红色荧光特性;α-Bungarotoxin(α-蛇毒素)是一种来源于眼镜蛇毒液的小型多肽蛋白,具有特异性结合乙酰胆碱受体的能力。该命名反映了分子由荧光染料与功能性多肽构成的复合物结构。

二、整体结构特点
AF594-α-Bungarotoxin 是通过共价偶联将荧光染料固定在 α-蛇毒素上的标记分子。结构中保留了 α-Bungarotoxin 的功能性结构域,使其能够特异性识别和结合受体;同时,AF594 提供稳定的红色荧光信号,可用于细胞或组织的示踪和定量分析。偶联通常发生在 α-蛇毒素的氨基或巯基残基上,而不影响其受体结合活性。

三、反应步骤概述

  1. 荧光染料活化:AF594 以羧基活化形式存在,通常通过 NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)形成活性中间体(AF594-NHS),该中间体可与蛋白质的伯胺基共价结合。

  2. α-Bungarotoxin 准备:将 α-蛇毒素溶解于适当缓冲液(如 PBS,pH 7.4),确保多肽的结构稳定,氨基和巯基可自由参与偶联反应。

  3. 偶联反应:将活化后的 AF594-NHS 缓慢加入 α-Bungarotoxin 溶液中,在室温下轻柔搅拌数小时,使染料与 α-蛇毒素的氨基残基形成稳定的酰胺键。反应条件通常避免高温、强光及极端 pH,以保护蛋白质活性和荧光稳定性。

  4. 纯化:反应完成后,通过透析、凝胶过滤或层析方法去除未反应的游离荧光染料及副产物,获得纯净的 AF594-α-Bungarotoxin。纯化过程需在避光条件下操作,以防荧光衰减。

  5. 质量验证:可通过紫外-可见吸收光谱、荧光光谱及 SDS-PAGE 等方法确认标记效率、分子完整性及荧光特性。

四、应用与特点
AF594-α-Bungarotoxin 主要用于神经科学和细胞生物学研究,可标记乙酰胆碱受体分布,实现受体定位、示踪及动态观察。其偶联方式温和且可控,保证 α-Bungarotoxin 的功能活性,同时提供明亮、稳定的红色荧光信号。

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产品名称:AF594-α-Bungarotoxin,AF594 荧光标记 α-眼镜蛇毒素
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研

厂家:瑞禧生物


产品目录

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