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一、中文名称
Cy5 标记的 α-Bungarotoxin 的中文名称通常为Cy5 荧光标记 α-眼镜蛇毒素,也可称为Cy5 修饰 α-蛇毒素。其中,α-Bungarotoxin 是来源于眼镜蛇毒液的一种小型多肽蛋白,具有特异性结合尼古丁型乙酰胆碱受体(nAChR)的能力;Cy5 是一种红色荧光染料,具有高亮度和光稳定性。该复合分子通过荧光标记实现 α-Bungarotoxin 的可视化示踪,广泛用于受体定位和神经科学研究。
二、制备方法概述
Cy5 标记 α-Bungarotoxin 的制备通常包括荧光染料活化、蛋白质偶联、纯化和质量验证四个步骤:
荧光染料活化
Cy5 荧光染料通常以 NHS-酯形式存在(Cy5-NHS),羧基经过 N-羟基琥珀酰亚胺活化,形成活性中间体。NHS-酯能够在温和条件下与蛋白质的伯胺基(主要是赖氨酸残基)共价结合,生成稳定的酰胺键。α-Bungarotoxin 溶解与准备
将 α-Bungarotoxin 溶解于适当缓冲液(如 PBS,pH 7.2–7.4),确保蛋白质结构完整。缓冲液选择需避免含有氨基或巯基的成分,以免干扰偶联反应。蛋白质浓度通常控制在 1–5 mg/mL,以保证充分反应而避免聚集。偶联反应
在缓慢搅拌下,将 Cy5-NHS 缓慢加入 α-Bungarotoxin 溶液中,保持室温反应 1–2 小时。反应过程中,NHS-酯端的活性羰基与 α-Bungarotoxin 上的伯胺基形成酰胺键,实现荧光染料的共价连接。反应条件温和,保证 α-Bungarotoxin 的受体结合活性不受影响。纯化
偶联完成后,通过透析、凝胶过滤或高效液相色谱(HPLC)去除未反应的游离 Cy5 荧光染料及副产物,获得纯净的 Cy5-α-Bungarotoxin。纯化操作需在避光条件下进行,以防荧光信号衰减。质量验证
通过 UV-Vis 光谱、荧光光谱及 SDS-PAGE 检测标记效率和蛋白质完整性。荧光光谱应显示 Cy5 的特征发射峰(约 670 nm),并且 α-Bungarotoxin 功能性通过受体结合实验或 ELISA 方法进行验证。
三、应用与特点
Cy5-α-Bungarotoxin 可用于神经肌肉接头和中枢神经系统中尼古丁型乙酰胆碱受体的定位与示踪,适合荧光显微镜和共聚焦显微镜观察。红色荧光信号明亮且光稳定,适合多通道成像和受体动力学研究。
产品名称:Cy5标记的α Bungarotoxin
纯度:95%+
规格:mg/g用途:科研
厂家:瑞禧生物

产品目录
CY3-Lysozym
CY3-溶菌酶
CY3-DSB
CY3-脱硫生物素
FITC-laminin蛋白
CY5-LPC溶血磷脂酰胆碱
CY3-Transferrin
CY3-转铁蛋白
FITC-Silk fibroin丝素蛋白
CY5.5-Fibrinogen
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