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AF488 Wheat germ agglutinin的合成路径与纯化工艺

时间:2025-12-24 17:14:26       浏览:56
产品名称:AF488 Wheat germ agglutinin的合成路径与纯化工艺
1. 核心特性与分子设计
AF488荧光特性:
属于Alexa Fluor系列近红外荧光染料,激发波长488 nm,发射波长519 nm,光稳定性高,背景荧光低,适用于共聚焦显微镜、流式细胞术及活体成像。
消光系数高(71,000 cm⁻¹·M⁻¹),量子产率0.92,耐光漂白,兼容多色荧光标记(如与DAPI、Cy3联用)。
小麦胚凝集素(WGA)特性:
来源于小麦胚芽,分子量约38 kDa,特异性结合N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)和唾液酸化糖链,用于标记细胞表面糖蛋白、糖脂及细胞外基质。
生物活性包括促进细胞黏附、抑制病毒入侵,广泛应用于细胞生物学、病理学及药物递送研究。
偶联设计:
通过NHS酯化学将AF488共价偶联至WGA的氨基,形成稳定酰胺键,保留荧光特性与凝集素活性;或采用点击化学(如DBCO-Azide)实现高效特异性偶联。
2. 合成路径与纯化工艺
合成策略:
NHS酯法:AF488-NHS酯与WGA在pH 8.0-8.5、室温避光条件下反应2-4小时,摩尔比1:1-1:5,生成AF488-WGA偶联物。
点击化学:DBCO-AF488与Azide-WGA通过无铜环加成反应,减少副反应,提升偶联效率。
条件优化:添加催化剂(如EDC/NHS)增强反应活性;无水溶剂(DMSO/PBS)避免水解。
纯化步骤:
透析/超滤:截留分子量10-30 kDa透析袋去除游离染料,超滤管浓缩产物。
色谱纯化:凝胶过滤色谱(Sephadex G-200)或离子交换色谱分离偶联物与游离蛋白,纯度≥95%;反相HPLC验证荧光标记效率。
无菌处理:无菌操作台分装,避免微生物污染。


关于我们:
西安瑞禧生物科技有限公司经营的产品种类包括有:近红外荧光染料、点击化学产品、合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯,二氧化硅及介孔二影产品,荧光蛋白及荧光探针等,欢迎咨询。


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