AF 488 WGA，Alexa Fluor488 标记的麦胚凝集素的合成及纯化过程

中文名称：Alexa Fluor 488 标记的麦胚凝集素

英文名称：Alexa Fluor 488–Labeled Wheat Germ Agglutinin（AF 488 WGA）

Alexa Fluor 488 标记的麦胚凝集素（AF 488 WGA）是一种将绿色荧光染料Alexa Fluor 488与麦胚凝集素（Wheat Germ Agglutinin，WGA）通过共价方式连接而形成的荧光探针。WGA是一种来源于小麦胚芽的凝集素蛋白，能够与含有N-乙酰氨基葡萄糖或唾液酸残基的糖链结构发生特异性结合，因此在细胞膜糖基分布、细胞表面标记以及组织切片染色中被广泛使用。Alexa Fluor 488属于荧光素类衍生染料，在蓝光激发下可发射明亮的绿色荧光，具有较好的光稳定性和信号一致性。AF 488 WGA常用于荧光显微镜、共聚焦成像以及流式细胞分析中，对细胞表面和胞内相关结构进行示踪和定位研究。

合成及纯化过程（Synthesis and Purification）
AF 488 WGA的制备通常采用活性酯偶联策略。首先，将纯化后的WGA蛋白溶解于适宜的缓冲体系中（如弱碱性磷酸盐或碳酸盐缓冲液），以保证蛋白分子中赖氨酸残基的氨基处于可反应状态。随后加入带有NHS活性酯基团的Alexa Fluor 488染料，使其与WGA分子表面的氨基发生酰胺化反应，形成稳定的共价键连接。反应过程中需控制染料与蛋白的摩尔比例、反应时间及温度，以获得合适的标记程度并减少蛋白结构变化。
反应完成后，体系中通常含有已标记的AF 488 WGA、未反应的游离染料以及少量副产物。纯化步骤一般采用凝胶过滤色谱、透析或超滤方法，将大分子蛋白与小分子染料有效分离。通过紫外-可见吸收光谱可对标记效率进行评估，并计算蛋白与染料的结合比例。最终产物通常以缓冲液形式保存，在低温和避光条件下储存，以维持其结合活性和荧光性能，满足后续实验应用需求。

厂家：瑞禧生物

产品目录

CY3-Glycoprotein
CY3标记的天花粉蛋白
Cy3-trichosanthin
CY3标记的铁氧还蛋白
CY3-Ferredoxin
CY3标记的铜蓝蛋白