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AF594 Tyramide Conjugates,AF594-酪胺偶联物的制备方法

时间:2025-12-29 09:56:58       浏览:63
AF594 Tyramide Conjugates,AF594-酪胺偶联物的制备方法

中文名称:AF594-酪胺偶联物
(亦称:Alexa Fluor 594-酪胺衍生物、AF594 荧光酪胺标记物)

AF594 Tyramide Conjugates 是将 Alexa Fluor 594(AF594)荧光染料与酪胺分子通过共价连接形成的功能化标记物。AF594 属于可见光区的红色荧光染料,激发波长约为 590 nm,发射波长约为 617 nm,具有良好的光稳定性和量子产率。酪胺部分包含对羟基苯乙胺结构,可在酶催化或化学氧化条件下生成活性自由基,并与蛋白质、核酸或其他生物分子上的芳香族残基形成共价结合,实现荧光信号固定化和局部累积。AF594-酪胺偶联物常用于免疫组化、原位杂交、细胞及组织成像,以及多色荧光检测实验。

制备方法(约600字):
AF594 Tyramide Conjugates 的制备主要包括荧光染料活化、酪胺偶联以及纯化几个步骤。

  1. 荧光染料活化
    首先,将 AF594 染料的羧基端通过活化剂(如 N-羟基琥珀酰亚胺,NHS)处理生成 NHS 酯,使其具有高反应活性,能够与伯胺或酪胺基团形成共价酰胺键。此步骤通常在干燥、无水的有机溶剂中进行,并保持适当温度以防止染料降解。

  2. 酪胺偶联反应
    将活化后的 AF594 NHS 酯与酪胺溶液混合,通过酰胺化反应将荧光染料连接到酪胺分子上。反应通常在缓冲体系(pH 7–9)下进行,以保证酰胺键形成的效率。酪胺中的对羟基苯乙胺结构在此过程中保持完整,为后续信号放大提供活性位点。

  3. 纯化与去除副产物
    反应完成后,通过高效液相色谱(HPLC)或透析方法去除未反应的染料、酪胺及副产物,获得高纯度的 AF594 Tyramide Conjugates。纯化后的偶联物通常为红色至深红色粉末或冻干固体,便于储存和后续使用。

  4. 储存条件
    纯化后的偶联物需在避光、低温(如 −20 ℃)和干燥条件下储存,以保持荧光性能和化学稳定性。溶液状态下可加入惰性缓冲液或保护剂,延长使用寿命。

瑞禧生物供应磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、磁性纳米颗粒、纳米金、近红外荧光染料、荧光量子点、碳纳米管、石墨烯及多种功能高分子材料。如有需求可咨询

纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
厂家:瑞禧生物

产品目录

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仅用于科研,不能用于人体。小编axc
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