英文名称: DiD (Red Fluorescent Cell Membrane Probe)
中文名称: 红色细胞膜荧光探针 DiD

CAS 号: 127274‑91‑3

反应步骤

DiD 是一种亲脂性碳氰染料，用于标记细胞膜和其他含脂结构，如脂质体或细胞器膜。其分子含有长烷基链，能够嵌入磷脂双层并沿膜面扩散，使整个细胞膜显示红色荧光。

实验操作中，DiD 本身不进行共价化学反应，其“反应”主要是物理嵌入和染色过程。首先，将 DiD 固体溶解成高浓度储备液，常用 DMSO 或乙醇溶解，配制为 1–5 mM 的储备液，并低温避光保存。

储备液使用前需稀释成工作液，一般在无血清培养基、PBS 或 HBSS 中稀释至 1–5 µM。具体浓度可根据细胞类型优化，以获得理想的染色强度。

对于悬浮细胞，将细胞以适当密度（如 1×10⁶/mL）悬浮于 DiD 工作液中，在 37 °C 温育 2–20 分钟。染色时间可根据细胞类型和膜染色效果调整。温育结束后，通过低速离心去除工作液，并用培养基或缓冲液洗涤数次，以去除未结合的染料。

对于贴壁细胞，可去除原培养基后加入工作液覆盖细胞，在 37 °C 温育数分钟至 20 分钟。温育后用培养基清洗细胞表面数次，以减少游离染料。

染色完成后，可使用荧光显微镜或流式细胞仪观察红色膜荧光信号。DiD 的激发波长约 644–657 nm，发射波长约 663–678 nm。染料在水中荧光较弱，只有嵌入膜后才能观察到明显信号，因此控制染色浓度和温育时间对于获得清晰、稳定的膜标记非常重要。

整个染色过程中，DiD 的物理嵌入和扩散决定了标记效果，避免高浓度或过长温育可减少非特异性信号，提高实验的可重复性。

厂家：瑞禧生物

产品目录

Liposomes-2-OA
脂质体-油酸偶联物,LIP-2-OA
Hyaluronic Acid-2-OA
透明质酸-油酸偶联物
HA-2-OA
Collagen-2-OA
胶原蛋白-油酸偶联物
COL-2-OA