产品名称：绿色荧光探针，5-FAM，76823-03-5，5-羧基荧光素的技术优势与特性
一、核心化学与光学特性
分子结构：分子式C₂₁H₁₂O₇，分子量376.32，橙黄色固体，熔点368-372°C，沸点725.2°C（760 mmHg），密度1.73 g/cm³，折射率1.816。结构含苯并呋喃酮共轭体系，5位羧基（-COOH）提供反应位点，可通过EDC/NHS活化与氨基形成稳定酰胺键。
光学性能：激发波长490-495 nm，发射波长515-520 nm，绿色荧光（量子产率约0.92），光稳定性良好（连续激发1小时荧光保留率＞80%），与氩离子激光器488 nm谱线高度匹配，适合荧光显微镜、流式细胞术及多色成像（如与AF647联用）。
溶解性：微溶于水，溶于DMF、DMSO、二氯甲烷等有机溶剂，需助溶剂（如乙醇）调节水相浓度。
二、技术优势
单一异构体稳定性
5-FAM为5位羧基单一异构体（区别于5(6)-FAM混合物或6-FAM），避免异构体混合导致的荧光信号不一致和偶联效率差异，确保实验重复性。其荧光强度在pH 6-8条件下稳定，适应生物体系酸碱波动（如细胞内环境）。
与6-FAM对比：6-FAM荧光强度更高（量子产率约0.95），但5-FAM在酸性环境（pH＜5）荧光保留率更优，适合特定pH敏感实验。
高效生物标记能力
羧基可通过碳二亚胺化学（EDC/NHS）活化，与蛋白质、核酸（如寡核苷酸5’/3’端）、多肽的氨基形成稳定酰胺键，用于免疫荧光、流式细胞术、Western blot、ELISA及荧光原位杂交（FISH）。
衍生探针（如5-FAM NHS Ester、5-FAM Maleimide）支持点击化学、生物正交反应，实现靶向递送（如脂质体/PLGA纳米粒负载）或诊疗一体化（与化疗药物/光敏剂偶联）。
生物兼容性与低毒性
细胞毒性低，适合活细胞成像（如膜蛋白动态追踪、内吞过程观察），可与细胞骨架蛋白、线粒体标记物共定位。
临床诊断应用：标记抗体/抗原用于肿瘤标志物检测（如流式细胞术）、病原体特异性抗体筛查（如肝炎、自身免疫病）。


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