产品名称：150408-83-6，5/6-TAMRA-NHS的实验应用操作
核心实验应用操作
场景 1：蛋白 / 抗体标记（最常用，如 IgG、酶、多肽）
缓冲液调节：将待标记蛋白（浓度 1-10 mg/mL）用 PBS（pH 8.0）或 CB 缓冲液（pH 8.5）透析平衡，或用超滤管更换缓冲液，去除游离氨基杂质。
投料反应：按摩尔比 1:3~1:10（蛋白：5/6-TAMRA-NHS）加入储备液（过量标记提升成功率），轻轻混匀；室温避光反应 1-2 h，或 4℃避光反应过夜（适合敏感蛋白）。
备注：蛋白分子量小（如多肽）可适当提高摩尔比至 1:15，确保标记充分。
终止反应：加入 1 mol/L 甘氨酸溶液（终浓度 50 mmol/L），室温避光孵育 15 min，封闭未反应的 NHS 酯基团。
纯化产物：用凝胶过滤层析（Sephadex G-25 柱）或超滤管（截留分子量适配目标蛋白），去除未结合的游离 5/6-TAMRA，收集橙红色目标蛋白溶液，4℃避光短期保存，-20℃分装长期保存。
效率检测：用紫外分光光度计，分别测 280 nm（蛋白吸收峰）和 544 nm（TAMRA 吸收峰）吸光度，计算标记率（理想标记率 1-3 个荧光分子 / 1 个蛋白）。
场景 2：细胞层面应用（细胞表面氨基标记、靶点成像）
细胞预处理：取对数期细胞（如贴壁细胞、悬浮细胞），用预冷的 PBS 洗涤 2 次，去除培养基中血清（血清含蛋白氨基干扰反应）；贴壁细胞可直接在培养板操作，悬浮细胞离心（1000 rpm，5 min）重悬。
孵育标记：用无血清 PBS（pH 8.0）配制 5/6-TAMRA-NHS 工作液（终浓度 5-20 μmol/L），加入细胞体系，37℃避光孵育 30-60 min，期间轻摇 1-2 次。
洗涤去游离：孵育结束后，用含 1% BSA 的 PBS 洗涤细胞 3 次，彻底去除未结合的荧光探针，避免背景荧光干扰。
检测 / 成像：
流式细胞术：将细胞重悬于 PBS，上机检测橙红色荧光信号，分析标记阳性率；
荧光显微镜：贴壁细胞直接用抗荧光淬灭封片剂封片，激发光选 540 nm 左右，观察细胞表面 / 靶点荧光分布，拍照记录。


关于我们：
西安瑞禧生物科技有限公司经营的产品种类包括有：近红外荧光染料、点击化学产品、合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯，二氧化硅及介孔二影产品，荧光蛋白及荧光探针等，欢迎咨询。


相关产品‌
Cl-PEG-Cl，氯-聚乙二醇-氯，Chlorine-PEG-Chlorine
Biotin‑PEG‑Biotin，聚乙二醇二生物素，Biotin‑PEG3400‑Biotin
mPEG-PLGA-Sodium Oleate，甲氧基聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸-油酸钠，mPEG-PLGA-油酸钠
COOtBu-PEG-Fluorescein，叔丁酯聚乙二醇荧光素，COOtBu-PEG-FITC
COOH-PEG-Glucose，羧基-聚乙二醇-葡萄糖，Acid-PEG-Glucose
DSPE-PEG2000-GPC3，磷脂-聚乙二醇-GPC3靶向肽，DSPE-PEG-GPC3
叠氮聚乙二醇乙酸叔丁酯，Azide-PEG-CH2COOtBu，叠氮四聚乙二醇乙酸叔丁酯
COOtBu-PEG-Rhodamine，叔丁酯聚乙二醇罗丹明‌，‌COOtBu-PEG-RB